微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌) | 仅供科研 | GOY-01J6563
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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
对 AR,99.5 %N,N-二甲基十二烷-N-氧化物 95%Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 人脑红蛋白
4-(三氟甲氧基) 99%β-甘油钠 98%,五水Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的牛血清白蛋白残留检测
焦钙 AR二苯乙炔 99%Human amyloid beta peptide 1-40,A Beta1-40 ELISA Kit 人β淀粉样蛋白1-40
四氧化三锰 SPN,N'-二苯基脲 98%Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂碱性蛋白
聚乙二单甲 均分子量350 N,N'-二苯基脲 95%Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 人高迁移率族蛋白B1
聚 平均分子量 2.0003,4-二氢-2H- 98%Human desmin,Des ELISA Kit 人结蛋白
聚 平均分子量 4002,2'-二羟基联苯 99%Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白
二苄 98%二巯基 97%Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 人S100B蛋白
德氏乳杆菌乳酸亚种(莱氏曼氏乳杆菌)间硝标准溶液 1000μg/ml,溶剂:Anti-phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 化三腺柠檬裂解抗体人线粒体乙脱氢(ALDM)联免疫吸附测定试剂盒
间硝 GR,99.0%Anti-phospho-Ataxin-1(Ser775) 化失调症蛋白1抗体人果糖二缩A(ALDOA)联免疫吸附测定试剂盒
对 AR,99.0%Anti-AVEN 凋亡、半胱蛋白激活抑制剂抗体人碱性鞘脂二酯(Alk-Smase)联免疫吸附测定试剂盒
对 99.7%Anti-Kir6.2 ATP敏感性通道亚kir6.2抗体人谷转氨(ALT)联免疫吸附测定试剂盒
间 GR,99%Anti-AVPR2 精氨受体2抗体人抑制素B(INHB)联免疫吸附测定试剂盒
间 CPAnti-Bdkrb2/B2R 缓激肽B2受体抗体人周期素依赖性激6(CDK6)联免疫吸附测定试剂盒
间 分析标准品,>99.7%Anti-Axin1 轴蛋白1抗体人α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP/α1M)联免疫吸附测定试剂盒
97%Anei-ATX 自分泌运动因子抗体人周期素依赖性激8(CDK8)联免疫吸附测定试剂盒
1,1-二硫硝乙烯 98%Anti-Aurora A 有丝分裂激A抗体人抗缪勒管激素(AMH)联免疫吸附测定试剂盒
2-溴-3-吡 97%Anti-Aurora B 有丝分裂激B抗体人化腺苷活化蛋白激(AMPK)联免疫吸附测定试剂盒
5-溴-2-氟吡 98%Anti-Aurora C 有丝分裂激B抗体人唾液淀粉α1(AMY1)联免疫吸附测定试剂盒
(R)-(+)-N-叔丁氧羰-3-氨吡咯烷 97%Anti-Aurora A/B/C 有丝分裂激A/B/C抗体人胰淀素(IAPP)联免疫吸附测定试剂盒
(s)-(-)-N-叔丁氧羰-3-氨吡咯烷 98%Anti-B7-H1/CD274 程序性死亡配体1抗体人周期素依赖性激抑制因子3(CDKN3)联免疫吸附测定试剂盒
代二膦 97%Anti-B7-DC/CD273 程序性死亡配体2抗体人血管抑素(ANG)联免疫吸附测定试剂盒
5--2-氟吡 99%Anti-ICOS-L/B7-H2/CD275 诱导协同激分子配体CD275抗体人血管紧张素II (Ang-II)联免疫吸附测定试剂盒