操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA检测试剂盒 |
英文名称 | Human advanced oxidation protein products (AOPP) ELISA Kit |
货号 | YS-H12263 |
试剂配制
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
高迁移率族蛋白-1(抗原) 0.5mgHMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)
促甲状素释放激素 10mgTRH (Thyrotropin releasing hormone )
(HPLC纯化) 鸡IgG 10mgChicken IgG
荧光素APC标记豚鼠IgM 0.1mlGuinea IgM/APC
Alexa Fluor 350标记小鼠IgG(细胞流式同型对照) 0.1mlMouse IgG/Alexa Fluor 350
罗丹明标记血蓝蛋白 0.3mlKLH/RBITC
乙型肝炎表面抗原 96THBsAg
人粒细胞趋化蛋白-2 96TGCP-2/CXCL6(Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2) ELISA Kit
兔胰淀素 96TAmylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit
植物生长激素 96TPlant growth hormone,GH ELISA Kit
小鼠溶菌酶 96TMouse Lysozyme,LZM ELISA Kit
小鼠可溶性CD30 96TsCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit
游离三碘甲状原氨酸T3 96TET3
人可溶性Endoglin 96TENG/sCD105(human Soluble Endoglin) ELISA Kit
人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA检测试剂盒甲磺酸加贝酯 规格: 100mg
大风子 规格: 5g
酞丁 规格: 50mg
返魂草(叶千里光) 规格: 5g
五脂素 规格: 20mg/支
酸皮肤素 规格: 30mg
雷公藤甲素(雷公藤内酯醇) 规格: 20mg
20(s)-人参皂苷Rh2 规格: 20mg
葡醛酸钠 规格: 100mg
木香烃内酯 553-21-9 规格: 20mg
苄赖氨酸 规格: 100mg
苦参 规格: 1g
苯钠 532-32-1 规格: 50mg
长春胺 1617-90-9 规格: 100mg