公司向您推荐大鼠滑膜细胞的详细说明:
产品名称 | 大鼠滑膜细胞 |
规格 | 5×105 |
货号 | YS-X6540 |
产品描述:提供的原代细胞均来自新鲜组织,提供的人源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、科技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞株的培养和传代培养:
用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养对细胞因子有依赖性的细胞株时还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,根据细胞生长特性,在适当的时候进行传代,一般3~4 天传代一次。
悬浮生长细胞的传代:
直接离心后吸去培养上清液,用新鲜培养液稀释悬浮细胞,一般按1:2-1:5 稀释细胞后,分瓶继续培养。
实验操作步骤:
a.采用认可的方案处死人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞啮齿动物。
b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。
c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。
d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。
e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
赖氨酸脱羧酶试验2-基-3-炔-2-醇 98%沙门氏志贺氏增菌液pUNO1-hATG14
氨基酸脱羧酶试验对照羟基叉二膦酸 60%水溶液0.1%煌绿pUNO1-hATG16L1a
无菌液体石蜡氨基三亚基膦酸 50%水溶液Kovcas氏靛基质试剂盒pUNO1-hATG3
ONPG 培养基固体亚磷酸 99.97% metals basis志贺氏菌增菌肉汤pUNO1-hATG4Aa
缓冲葡萄糖蛋白胨水四基氧化铵 AR,25%醇溶液精氨酸双水解酶试验用培养基(AD)pUNO1-hATG4Ba
V-P 试剂四基氧化铵 五水合物 97%嗜盐性试验用胰胨水pUNO1-hATG5
蛋白胨水1,4-对二氯苄 98%副溶血性弧菌成套生化鉴定管(HRGB)pUNO1-hATG7a
Kovacs 氏靛基质试剂亚磷酸三酯 98%麦芽浸膏琼脂pUNO1-hATG9A
磷酸盐缓冲液pH7.2胆固醇油酸酯 99%皮肤癣菌鉴别琼脂(DTM)pUNO1-hAXLa
无菌磷酸盐缓冲液pH7.2N-溴代二酰亚胺 CP,98.5%改良Camp-BAP氏琼脂添加剂ApUNO1-hB2M
大鼠滑膜细胞苯标准溶液0.96mg/ml,溶剂:醇TE缓冲液,pH=8.0果胶Mouse PKB(Protein Kinase B) ELISA Kit
Mouse PKCe(Protein Kinase C Epsilon) ELISA Kit
水质生化需氧量标样 浓度范围:61.8-148(mg/L),分析标准品10×TE缓冲液,pH=8.0富硒酵母Mouse PKR1(Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit
Mouse PLA2G2D(Phospholipase A2, Group IID) ELISA Kit
水质总铍标样 分析标准品10× TE缓冲液,pH=8.0三聚氰胺Mouse PMP3(Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit
Mouse POMC(Proopiomelanocortin) ELISA Kit
水质溴标样 分析标准品MES buffer(0.01mol/L,pH6.0)鬼臼毒素Mouse PP(Pepsin) ELISA Kit
Mouse PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator-activated receptor γ) ELISA Kit
水质硼标样 分析标准品MES buffer(0.05mol/L,pH4.7)药用薄膜包衣预混剂Mouse PRF1(Perforin 1) ELISA Kit
Mouse Pro-ANP(Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
醇中苯系物混合标样 分析标准品MES buffer(0.05mol/L,pH5.5)药用薄膜包衣预混剂Mouse PROC(Protein C) ELISA Kit
Mouse PSA(Prostate Specific Antigen) ELISA Kit
二硫化碳中苯系物混合标样 110μg/mlMES buffer(0.05mol/L,pH6.0)猪胆粉Mouse PTD(Pentosidine) ELISA Kit
Mouse PTGES(Prostaglandin E Synthase, Microsomal) ELISA Kit
铜标准溶液1.0mg/l,水质标样MES buffer(0.05mol/L,pH6.5)玉米黄质Mouse PTGS1(Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit
Mouse PTH(PaRathormone) ELISA Kit
铜标准溶液 1000mg/l,溶剂:1%硫酸MES buffer(0.05mol/L,pH8.0)4-氨基-2,6-二氯嘧啶Mouse PTHrP(PaRathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit
Mouse PTN(Pleiotrophin) ELISA Kit
铜标准溶液 500mg/l,溶剂:1%硫酸MES buffer(0.1mol/L,pH4.7)基烯酸环己酯Mouse PTPRN(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit
Mouse PVRL2(Poliovirus Receptor Related Protein 2) ELISA Kit
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。