参数规格:
产品名称:流行性出血热病毒RT-PCR试剂盒
产品货号:YS-P013412
产品规格:50次
产品分类:PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.公司产品仅用于科研对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
小鼠端粒酶(TE)酸(标准品)氯霉素单克隆抗体
小鼠肌腱蛋白C(TNC)36%酸(标准品)CD98重链抗原抗体
小鼠肌腱蛋白X(TNX)酸(HPLC,≥99.9%)钙蛋白酶抑制蛋白抗体
小鼠畸胎瘤衍生生长因子1(TDG1)Amberlite® IRP-69阳离子交换树脂cGMP依赖性蛋白激酶1抗体
小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)苊烯(标准品)胞浆钙独立磷脂酶A2抗体
小鼠TGF-β诱导早期因1(TIEG1) 二烯与烯磺酸钠的聚合物1号染色体开放阅读框98抗体
小鼠硫氧还蛋白结合蛋白2(TBP2)二胍(标准品)COX4NB蛋白抗体
小鼠硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1) 13-酰-9-羟巴卡丁III(标准品)肿瘤/抗原77抗体
小鼠硫氧化还原蛋白(Trx) (+)-(标准品)CD81抗体
小鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)酸龙脑酯(标准品)辅酶Q10B抗体
小鼠凝血酶受体(TR)二氢丹参酮(标准品)因子受体样因子1抗体
小鼠凝血酶敏感蛋白1(TSP-1) 锑标准溶液(1000μg/ml,体:6.0 mol/L HCl)半胱氨酸亚磺酸脱羧酶抗体
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)锑标准溶液(1000μg/ml,,溶剂:盐酸)型肝炎NS2反式调节蛋白/衰老相关的因10蛋白抗体
小鼠血栓调节蛋白(TM)锑标准溶液(100mg/L,溶剂:1%盐酸)固酮合成酶CYP11B2抗体
小鼠促血小板生成素抗体锑标准溶液(100mg/L(20℃), 体: 20%HCl)分裂周期蛋白8抗体
小鼠促血小板生成素受体抗体锑标准溶液(分析标准品,1.24±0.26mg/L)卷曲螺旋结构域蛋白5抗体
流行性出血热病毒RT-PCR试剂盒IL-20R alpha/IL20RA 白介素20受体α链抗体邻氨 98%
IL-20RB/IL-20R2 白介素20受体β链抗体3,3-二酸 99%
IL-21 白介素21抗体1-二氢茚酮 99%
IL-21R 白介素21受体抗体二酰氯 97%
IL-22 白介素-22抗体4-硝肉桂酸 98%
IL-22R 白介素-22受体抗体二酸 98%
IL-22BP/IL22RA2 白介素22受体结合蛋白抗体3,4,5-氧肉桂酸 99%
IL1RAPL1 白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体二(2,4,6-酰)氧化膦 97%
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。