细胞转染：
1. LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞转染试剂的准备
① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
名称 | LNCaP clone FGC (人前列腺癌细胞) (STR鉴定正确) |
别称 | LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC |
种属 | 人类 |
年龄（性别） | 男性，50岁 |
组织来源 | 前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | 人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶封包后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24-48小时，以使细胞再贴壁。此后，可以换上新鲜培养液。如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~32-36小时 |
冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
致瘤性 | Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice. |
受体表达情况 | androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive |
基因表达情况 | human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen |
注意事项 | （1）这株细胞并不形成一致的单层，而是形成集落。传代时如消化后细胞形成聚团，可以用滴管反复吹吸打碎。 （2）该细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。生长很慢。传代后 48 小时内不应扰动。需使用 Corning 的 cellbind 细胞培养瓶，货号是 3289；或者使用多聚赖氨酸 包被过的培养皿。 （3）在细胞运输途中，多数细胞会从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养 24-48 小时，以使细胞再贴壁。此后可以换上新鲜培养液。 |
保藏机构 | ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211 |
细胞传代：
1. 试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。
2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。
3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。
4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。
5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。
6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。
7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。
8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。
9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。
细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。
Ninein样蛋白封闭多肽 | 鸡减蛋综合征病毒1976PCR检测试剂盒 |
梅毒螺旋体(苍白密螺旋体)PCR试剂盒 | 鳄失调蛋白ELISA试剂盒 |
人八聚体转录因子(OTF2A) ELISA试剂盒 | 动力蛋白激活蛋白3ELISA试剂盒 |
人白介su12受体亚基β-1(IL12RB1/IL12R/IL12RB)ELISA检测试剂盒 | DEAD框肽5ELISA试剂盒 |
人A(VA)elisa试剂盒 | γELISA试剂盒 |
人程序性细胞死亡因子4(PDCD4)试剂盒ELISA | UV切除修复蛋白RAD23同源物AELISA试剂盒 |
UL16结合蛋白2封闭多肽 | 病毒H/H/H亚型(AIV-H/H/H)核suan检测试剂盒 |
酪氨suan蛋白激mei受体B2封闭多肽 | 牛细小病毒PCR试剂盒 |
Cullin 4a蛋白封闭多肽 | 鲨鱼源性成分（Shark）核suan检测试剂盒 |
中心体蛋白27封闭多肽 | 耐PCR检测试剂盒 |
C末端结合蛋白2封闭多肽 | 蜜蜂微孢子虫通用PCR试剂盒 |
肿瘤坏死因子受体超家族成员19L封闭多肽 | LNCaP clone FGC人前列腺癌细胞诺氏疟原虫PCR试剂盒 |
重组人CD3E蛋白 | 疟原虫通用PCR试剂盒 |
富含重复蛋白Q4封闭多肽 | 蜜蜂球囊菌PCR试剂盒 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白15封闭多肽 | 蜜蜂微孢子虫通用PCR检测试剂盒 |
