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名称 | HCT 116 (人结肠癌细胞) (STR鉴定正确) |
别称 | HCT-116; HCT.116; HCT_116; HCT116; CoCL2 |
种属 | 人 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长培养基 | McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S |
冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
背景描述 | HCT 116细胞是由M·Brattain等人于1979年从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞中的一株。HCT 116细胞在半固体琼脂糖培养基中形成克隆；HCT 116细胞在无胸腺裸鼠有致瘤性，形成肿瘤结节。 |
年龄（性别） | 男；成年 |
组织来源 | 结直肠癌 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 肠癌细胞 |
生物安全等级 | 1 |
倍增时间 | ~25-48 hours |
致瘤性 | Yes, in nude mice. |
基因表达情况 | carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6 cells per 10 days. |
保藏机构 | ATCC; CCL-247 BCRC; 60349 BCRJ; 0288 DSMZ; ACC-581 |
细胞传代：
1. HCT116人结肠癌细胞试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。
2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。
3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。
4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。
5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。
6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。
7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。
8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。
9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。
细胞转染：
1. 转染试剂的准备
① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
1号染色体开放阅读框104封闭多肽 | 产气荚膜梭状芽孢杆菌通用PCR检测试剂盒 |
地衣形芽孢杆菌PCR试剂盒 | 电压依赖性阴离子通道蛋白1ELISA试剂盒 |
人β1能受体(β1AR)抗体ELISA检测试剂盒 | 蛋白O-岩藻糖基转移mei1ELISA试剂盒 |
人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)检测试剂盒elisa | 细胞周期suTELISA试剂盒 |
人非甲基化寡核苷suan(NON)ELISA试剂盒 | 转运体样蛋白4ELISA试剂盒 |
人多萜长醇二磷suan寡糖蛋白环糊精糖基转移mei(DDOST/OST-48)试剂盒ELISA | 白细胞酯meiELISA试剂盒 |
单核细胞趋化蛋白4封闭多肽 | 鱼类神经坏死病毒（VNN）核suan检测试剂盒 |
LYPD3蛋白封闭多肽 | 气管比翼线虫PCR检测试剂盒 |
CD99样蛋白2封闭多肽 | 猪蓝耳病病毒经典型(PRRSV-C)核suan检测试剂盒 |
肿瘤坏死因子配体超家族成员14封闭多肽 | 霍乱弧菌CTX基因PCR检测试剂盒 |
ChAT乙酰转移mei封闭多肽 | 马乳头瘤病毒PCR检测试剂盒 |
RASAL3蛋白封闭多肽 | HCT116人结肠癌细胞禽波氏杆菌PCR试剂盒 |
卵透明带糖蛋白2封闭多肽 | 腔阔盘吸虫PCR试剂盒 |
脱氧三磷suan核苷水解mei封闭多肽 | 马生殖泰勒氏菌PCR试剂盒 |
KB抑制蛋白激meiβ封闭多肽 | 马疱疹病毒型PCR检测试剂盒 |
细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。
