公司向您推荐大鼠结肠上皮细胞的详细说明:
产品名称 | 大鼠结肠上皮细胞 |
规格 | 5×105 |
货号 | YS-X6560 |
产品描述:提供的原代细胞均来自新鲜组织,提供的人源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、科技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
细胞株的培养和传代培养:
用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养对细胞因子有依赖性的细胞株时还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,根据细胞生长特性,在适当的时候进行传代,一般3~4 天传代一次。
悬浮生长细胞的传代:
直接离心后吸去培养上清液,用新鲜培养液稀释悬浮细胞,一般按1:2-1:5 稀释细胞后,分瓶继续培养。
实验操作步骤:
a.采用认可的方案处死人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞啮齿动物。
b.立即在无菌超净台内用70%乙醇擦洗整个动物。
c.用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。
d.用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宫,置于无菌的培养皿上。
e.剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
氧化酶试纸槐果碱 分析标准品,≥98%胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础pUNO1-hDNMT3Bc
氧化酶试剂菝葜皂苷元 分析标准品,≥98%沙氏葡萄糖液体培养基(2015药典)pUNO1-hDNMT3Lb
赖氨酸脱羧酶肉汤LDC五味子素 分析标准品,>98% CIN培养基pUNO1-hDOK3ba
鸟氨酸脱羧酶肉汤ODC紫草素 分析标准品,≥97%波尔顿选择性肉汤pUNO1-hDOT1L
精氨酸双水解酶肉汤ADH绞股蓝皂苷 分析标准品,UV≥98%梭菌强化琼脂pUNO1-hDUFFYb
培养基五味子素 分析标准品,>98%亚硫酸铁多粘菌素B琼脂pUNO1-hEEF2
氨基酸试验对照五味子醇 分析标准品,>98% DTA培养基pUNO1-hEG1
无菌液体石蜡延胡索素 97%MRS培养基pUNO1-hEGF
溶液3,3’-二没食子酸酯茶黄素 分析标准品, ≥98.0% (HPLC)肠毒素产毒培养基(不含琼脂)pUNO1-hEGFRa
β-半乳糖苷酶试剂盐酸拓扑替康 分析标准品,≥99%(HPLC)甘露醇高盐琼脂pUNO1-hELF4
大鼠结肠上皮细胞多氯联苯(Aroclor 1254)标准溶液制霉菌素 4400u/mg酿酒酵母Monkey FSH(follicle-stimulating hormone) ELISA Kit
Monkey GNRH(Gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit
多氯联苯(Aroclor 1260)标准溶液制霉菌素 4400u/mg大豆浓缩蛋白Monkey CTXI(Cross-linked C-opeptide of Type I Collagen) ELISA Kit
Monkey BGP(Osteocalcin) ELISA Kit
间苯二酚标准溶液 1000μg/ml,溶剂:醇制霉菌素 4400u/mg微晶蜡Porcine ACTH(Adrenocorticotropic Hormone) ELISA Kit
Porcine ADP/Acrp30(Adiponectin) ELISA Kit
水质硒标样 浓度范围:4.95-20.2(mg/L),分析标准品Oligomycin 寡霉素米力农Porcine ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
Porcine ANG(Angiogenin) ELISA Kit
钠标准溶液 500mg/L,溶剂:水Oxyteracycline HCL 盐酸土霉素替米考星Porcine ANG2(Angiopoietin 2) ELISA Kit
Porcine ANP(Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
钠标准溶液1.50mg/L,水质标样Oxyteracycline HCL 盐酸土霉素敌草隆Porcine ApoA1(Apolipoprotein A1) ELISA Kit
Porcine ApoA4(Apolipoprotein A4) ELISA Kit
苯烯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳Paromomycin sulfate salt 硫酸巴龙霉素磺化褐煤(SMC)Porcine ApoB(Apolipoprotein B) ELISA Kit
Porcine ApoE(Apolipoprotein E) ELISA Kit
苯烯标准溶液 1000μg/mlParomomycin sulfate salt 硫酸巴龙霉素月见草提取物Porcine ApoM(Apolipoprotein M) ELISA Kit
Porcine AR(Amphiregulin) ELISA Kit
水质银标样 分析标准品Penicillin G Sodium salt 青霉素G钠盐 Amresco微晶蜡Porcine BALP(Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
Porcine BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
水质锶标样 浓度范围:2.00(mg/L),分析标准品Penicillin G Sodium salt 青霉素G钠盐 AmrescoN-苯酰胞苷Porcine bFGF/FGF2(Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit
Porcine BK(Bradykinin) ELISA Kit
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。