Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

产品介绍：

Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

该制品为双组分的试剂，Basic Buffer Mix 包含了反应缓冲液、Mg2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、冻干赋形剂，酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、热敏 UDG。得益于 Bst 4.0 识别 dUTP 底物，反应底物中不包含dTTP，因此扩增产物均为 dUTP 产物，在配合热敏 UDG的情况下，实现防污染性能。在实际测试中，含有 10e5Copies 的污染物的条件下，抑制污染扩增。本制品尤其适用于开盖的 LAMP 反应（如试纸条检测）、密封腔体（污染风险较高）的检测试验（如定量 PCR腔体）。
试剂使用特点：
（1）Basic Buffer Mix 中不含染料，可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料进行荧光检测。
（2）本试剂适用于开盖检测如核酸试纸条检测。
（3）试剂中含有冻干赋形剂，试剂可直接冻干，无需再优化冻干配方。

储存：-20℃保存 1 年；-80℃保存 2 年；短期使用放置于2-8℃，保存 1 个月。反复冻融 10 次，不影响使用。如有白色沉淀，于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀，不影响使用。
使用方法：
1. 配制 LAMP 反应体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
注意：如何应用核酸试纸条进行特异性检测，可来信咨询。
2. 反应体系配好后，室温（25-37°C）放置 2min，以消化去除潜在的核酸污染，随后置于 65°C 进行反应15~30min。
试剂冻干策略（有冻干经验人员操作）：
1. 配制 LAMP 冻干体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
ddH2O 到体积 1.5 μl
冻干总体积 15 μl
2. 体系配制完毕后，加入 0.2 ml EP 管进行上机冻干。该试剂的冻干体积为 15 μl， 检测反应体积为 25 μl。

特别说明：
（1）本试剂防污染原理为：热敏 UDG 消化去除含有 dUTP的扩增产物，热敏 UDG 在随后 50℃以上迅速失活，并不影响后续 LAMP 扩增。因此，本试剂无法去除采用 dTTP扩增的污染物，也不能消化天然的核酸底物（DNA/RNA）。为避免扩增气溶胶污染，实验室应长期使用本试剂进行实验，一旦使用 dTTP 试剂扩增后，造成实验室污染，采用本试剂不会消除假阳性扩增。
（2）本试剂适用基于 OG 染料变色法、SYBR Green 法、基于 Biotin/FAM 探针的核酸胶体金法（ 具有胶体金法特异性使用策略，如需技术支持，请来信咨询）。本试剂不支持 HNB、pH 显色法。其它使用策略自行优化调整。
（3）基于本试剂， 提供冻干制备服务。八联管起订量 480T，冻干球起订量 2000T。

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