参数规格:
产品名称:MnCl2溶液 100 mM PCR级
产品分类:RNA/DNA提取试剂盒
货号:CP100735
产品规格:详见说明
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
MUG 4-伞形酮葡萄糖苷酸 0mg (3R)-(+)-Benzyl-(tert-butoxycarbonylamino)pyrrolidine1318783(3R)-(+)-苄基-(叔丁氧羰基氨基)
MV 紫晶 1g(2Z,6Z,E,14E,18E)-Farnesylfarnesol6953
myo-Inositol(肌醇) 0g(2R,3S)-Phenylisoserine ethyl ester14361
N-Acetyl-α-D-Glucosamine N-乙酰-α-D-氨基葡萄糖 5g (2-Benzothiazolylthio)acetic acid629572-(苯并噻唑基硫代)乙酸
NAD 2mg/0mg/1g(1S,2S)-Amino-Indanol16614(1S,2S)-氨基-茚醇
小鼠肝表达趋化因子(LEC)ELISA试剂盒 Dantron 中文名:1,8-二羟基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0%
小鼠甘油三酯脂肪酶 英文名称: Mouse iglyceride Lipase 规格: 48T/96T 英文缩写: TGL Herbarin 中文名: 分子式:C16H16O6
小鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 Dantron 中文名:1,8-二羟基蒽醌 分子式:C14H8O4
小鼠甘油三酯 英文名称: Mouse iglyceride 规格: 48T/96T 英文缩写: TG Herbarin 36379-67-6 中文名: 分子式:C16H16O6 度:97.0% 关键词: 萘醌; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库
小鼠甘油 英文名称: Mouse Glycerin 规格: 48T/96T 英文缩写: GLY Dantron 117-10-2 中文名:1,8-二羟基蒽醌 分子式:C14H8O4 度:98.0% 关键词: 掌叶大黄; 金鸡纳树; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
MnCl2溶液 100 mM PCR级草酸依地普仑/草酸艾司西酞普兰(标准品) Escitalopram Oxalate 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 试剂盒
消旋卡多曲 Racecadotril 质量规格:>99.5%,EP6.2 Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒
消旋卡多曲(标准品) Racecadotril 质量规格:HPLC>98%,标准品 HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
乙酰螺旋霉素 Acetylspiramycin 质量规格:>1200u/mg,CP2005 cit瓜氨酸规格:96T/48T
尼罗替尼 Nilotinib 质量规格:>98.5%,BR 载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
尼罗替尼(标准品) Nilotinib 质量规格:HPLC>98%,标准品 Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
螺旋霉素 Spiramycin 质量规格:>3900IU/MG,EP,BR,可用于细胞培养 小鼠酶Ⅸ(CA9)ELISA试剂盒 ,英文名: CA9 ELISA Kit
螺旋霉素(标准品) Spiramycin 质量规格:含量测定,标准品 豚鼠白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T
螺内酯 Spironolactone 质量规格:>99%,USP 32,BR,可用于细胞培养 牛0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)试剂盒 Bovine phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit
螺内酯(标准品) Spironolactone 质量规格:HPLC>98%,标准品 英文名称HumanActininαELISAKit人横纹肌辅肌动蛋白α(Actininα)ELISA试剂盒规格:96T/48T
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。