公司专注于细胞培养及细胞销售的细胞生物学技术研发的高科技企业,主要拥有复苏及冻存细胞及相关技术服务,公司主要为细胞生命科学研究人员提供有效的、 Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-595技术培训、售后服务,其细胞主要来源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等细胞库,以及部分国内外细胞研究机构建系。
细胞名称 Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-595
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:3~1:6传代;每周换液2~3次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:17,17;D13S317:10,13;D16S539:9,12;D18S51:13,13;D19S433:15,15.2;D21S11:28,28;D2S1338:17,17;D3S1358:14,15;D5S818:11,12;D6S1043:12,12;D7S820:8,8;D8S1179:13,13;FGA:21,24;Penta E:12,12;TH01:7,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-595处理方法
1、用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是经过灭菌处理的)培养瓶外部。
2、肉眼观察培养基,若出现浑浊情况,请及时。
3、将细胞置于显微镜下观察,如有污染,请及时。
4、严格无菌操作,拆下封口膜,如果细胞的量较少,可放置温箱中继续培养。如果细胞量足够,可进行离心收集细胞,用1×PBS洗两遍,加入新鲜培养液后置于37℃,5%CO 2的培养箱中继续培养。若细胞密度达到80%以上或存在成团现象,建议用0.25%*消化后传代培养。
5、如果细胞为冻存状态,可将其继续放入液氮中继续保存。也可将其放入37℃的水浴中不时摇动,尽快解冻。解冻后,用75%酒精将冻存管擦拭干净,用吸管吸出细胞悬液,放入培养瓶中,再加入相应的细胞培养液,放于37℃培养箱中继续培养。
细胞培养知识:
1.应如何避免细胞污染?
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。
2.如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?
直接灭菌后丢弃之。
3.购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?
研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少, 大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性 损伤, 以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
4.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳, 常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用 错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于-80℃太久。
5.收到之冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?
冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血 钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)48T/96T
周期素依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)48T/96T
*γ(Amyγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Amylase Gamma (Amyg)48T/96T
唾液*α1(AMY1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Amylase Alpha 1, Salivary (AMY1)48T/96T
组织因子通道抑制因子(TFPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血小板生成素(TPO)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)48T/96T
组织因子通道抑制因子(TFPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Oryctolagus cuniculus (Rabbit)ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)48T/96T
磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*型纤溶酶原激活因子(uPA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Phospholipase A2 Activating Protein (PLAA)48T/96T
磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Phospholipase A2 Activating Protein (PLAA)48T/96T
血红素氧合酶1(HO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)48T/96T
血红素氧合酶1(HO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)48T/96T
血红素氧合酶1(HO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血管内皮生长因子A(VEGFA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)48T/96T
糖抗原125(CA125)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血管内皮生长因子C(VEGFC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Carbohydrate Aigen 125 (CA125)48T/96T
*3(KLK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*3(KLK3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3)48T/96T
*3(KLK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3)48T/96T
前列腺酸性磷酸酶(ACP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)糖抗原15-3(CA15-3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Acid Phosphatase 3, Prostatic (ACP3)48T/96T
前列腺酸性磷酸酶(ACP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)糖抗原19-9(CA19-9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Acid Phosphatase 3, Prostatic (ACP3)48T/96T
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血小板因子4(PF4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)48T/96T
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)血小板因子4(PF4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)48T/96T
髓鞘碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)糖化血红蛋白(HbA1C)检测试剂盒(化学发光免疫 Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975-Cas9-595分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)48T/96T
髓鞘碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)纤维蛋白原(FG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)48T/96T
髓鞘碱性蛋白(MBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)髓细胞触发受体1(TREM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)48T/96T
细胞周期素D1(CCND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)α1-微球蛋白(α1M)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)48T/96T
细胞周期素D1(CCND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)牛血清白蛋白(BSA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)48T/96T
细胞周期素D1(CCND1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)*(TRY)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)48T/96T
细胞周期素D2(CCND2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)β2-微球蛋白(β2M)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin D2 (CCND2)48T/96T
细胞周期素D2(CCND2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Cyclin D2 (CCND2)48T/96T
细胞周期素D2(CCND2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)甲状腺结合球蛋白(TBG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Cyclin D2 (CCND2)48T/96T
细胞周期素D3(CCND3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)抗白蛋白抗体(AAA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin D3 (CCND3)48T/96T
细胞周期素D3(CCND3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)甲状腺球蛋白(TG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for Cyclin D3 (CCND3)48T/96T
细胞周期素D3(CCND3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)凝溶胶蛋白(GS)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)Mus musculus (Mouse)ELISA Kit for Cyclin D3 (CCND3)48T/96T