产品名称：Toneclone同源重组试剂盒
英文名称：Toneker Fast-Fusion Cloning Kit
Toneclone 无缝克隆试剂盒报价产品规格：
产品编号 | 产品规格 | 产品价格 |
TK01143 | 10次/盒 | ￥400 |
TK01145 | 50次/盒 | ￥900 |
Toneclone 无缝克隆试剂盒报价产品组成：
1、Fast-Fusion Enzyme
2、10× Fast-Fusion Buffer
产品简介：
Toneclone同源重组试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组，可将插入片段PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’zui末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的**的序列 (15 bp～21 bp)。这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合后，在Fast-Fusion Enzyme的催化下，zui快仅需反应5 min，即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。
产品特点：
1、操作简便：无需考虑酶切点限制；
2、快速重组：15min实现载体和片段的快速重组；
3、效率更高：重组效率为传统酶切连接技术的5-10倍，无载体自连现象，阳性克隆可达90%以上。
产品应用：
1、PCR产物克隆进载体
2、基因转移
3、在插入片段前后插入adaptor、linker和标签
4、高通量克隆
实验方案
常见问题与解决方案
问题 | 可能的原因 | 解决方案 |
平板上无克隆或克隆数目很少 | 引物序列不正确 | l 确认引物序列含有15 bp与载体插入区域**的同源序列。 |
PCR产物不纯 | l 优化PCR扩增反应以得到单一PCR产物。 l 换一种纯化方法，纯化您的PCR产物。 | |
反应体系中DNA浓度太低 | l 在重组反应中，加入*的DNA量。 | |
不纯的载体或插入片段抑制重组反应 | l *采用胶回收或离心柱法纯化DNA后进行重组反应。 | |
转化过程中加入重组反应液过多 | l 重组反应液的转化体积不应超过转化细胞体积的1/10。 | |
感受态细胞转化效率低 | l 更换新鲜、高效的感受态细胞。 | |
培养基中加入错误或过多抗生素 | l 在转化平板中加入正确、适量的抗生素。 | |
假阳性克隆数目多 | 克隆载体线性化不* | l 重新酶切您的载体，增加酶切时间，并胶回收纯化。 |
PCR使用的模板质粒抗性与所需克隆载体抗性相同造成的污染 | l 可在PCR反应之前先将模板质粒线性化。 l PCR产物用DpnI处理，消化模板质粒，然后再纯化。 | |
转化用平板放置时间过长导致抗性失效 | l 确认平板新鲜配置，并含有正确、适量的抗生素。 | |
克隆含有不正确的插入片段 | PCR产物混有非特异性片段 | l 优化PCR扩增体系，提高特异性或胶回收纯化目的片段。 |
同科生物简介：成立于2007年，是一家集研发、生产、销售和技术服务于一体专注于生命医学和生物技术领域的高科技企业。主营业务有科研产品、诊断试剂、分子诊断和技术服务等，主要服务于科研机构、大专院校、医院和工业等客户。
生产科研：同科生物搭建多个研发与合作技术平台（博士后实践基地、院士工作站、同济大学人才培养与产学研合作基地及生物研究中心等），为技术创新提供了坚实的基础保障。拥有三类体外试剂生产中心、仪器生产中心、研发质检实验室等、厂房和实验面积达8000多平米，仪器设备设施*齐全（包括定量PCR仪、生物安全柜、核酸蛋白测定仪、高压细胞破碎仪、FPLC等系列精密仪器设备）。
研发团队：同科拥有一支由中科院院士为顾问，国家千人为*科学家，以博士硕士为主体的高效的化研发团队。研发人员专业涵盖生物化学、分子生物学、临床医学、免疫学、药物制剂、生物技术、遗传学、微生物学、生物工程领域，关联性较大，专业结构合理，且形成互补，在重大项目及关键技术上具备的攻关能力。
仓储物流：在全国布局多个仓储基地，货品齐全，全国发货，及时给力！
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