总蛋白提取试剂盒50T实验方法

总蛋白提取试剂盒50T实验方法产品简介：

总蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了。本试剂盒含有的*配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

总蛋白提取试剂盒50T实验方法实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
    把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
总蛋白提取试剂盒50T实验方法注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
小麦 Triticum aestivum L. beta-Sitosterol β-谷甾醇 19044-06-5 C29H50O ≥98%

马钱苷McQicngcn20mg/支

比枯枯灵;毕灵(减)，荷包牡丹减;三乌龟减 Bicuculline 485-49-4 20mg HPLC≥98% 用于含量测定

中药对照药材白蔹121498-200501TLC法鉴别

DIDEOXYFORSKOLIN, 1,9- 福斯高林1,9-二脱氧纯度：>95%
152943-33-4 言安他酮杂质标准品(避光),(+4℃,+4℃)(危险品) 40mg

银杏叶Ginkgo biloba Leaf P.E. 果内酯 33570-04-6 C15H18O8 ≥98% * - 对照谱图(Y0000215

CMMP标准品 CNA标准品 CNP标准品

Granisetron xy7nochloride *标准品107007-99-8 150mg

鞣花酸 476-66-4 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
10-脱乙酰巴卡亭 10-DAB (≥98%,HPLC) 32981-86-5 20MG 标准品

玉兰Magnolia denudata 望春玉兰同 A 116424-69-2 C21H24O6 ≥95% 膦钠六水合物(F0 89000

对照品*100257-200002含量测定

Fumaric Acid 富马酸标准品110-17-8 200mg富马酸标准品

白桦 Betula alba L. Betulin 白桦脂醇 473-98-3 C30H50O2 ≥98%
大鼠血小板生成素(TPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人酰基化饥饿素(AG)免疫试剂盒 Human acylated ghrelin,AG ELISA Kit

多酚氧化酶(PPO)测试盒 可见分光光度法 50管/24样

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HumanCiliaryNeurotrophicFactor,CNTFELISA试剂盒人睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

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humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISAKit人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒规格：96T/48T
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