即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片详细说明书:
即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片变性温度与时间:
模板变性温度是决定 PCR 反应中双链 DNA 解链的温度,达不到变 性温度就不会产生单链 DNA 模板,PCR 也就不会启动。变性温度低则变性不*, DNA 双链会很快复性,因而减少产量。变性温度太高,又会影响酶的活性。一般情况 下可设为 94℃ 20~30 秒,高温时间应尽量缩短,以保持耐热 DNA 聚合酶的活力, 高变性温度不宜超过 95℃。 退火温度与时间:退火温度决定 PCR 特异性与产量。温度高特异性强,但过高则引物 不能与模板牢固结合.
即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片DNA 扩增效率下降;
温度低产量高,但过低可造成引物与模板 错配,非特异性产物增加。合适的退火温度一般在 45~68℃之间。设置特定反应的 适退火温度,可根据引物的(G+C)%含量进行推测,一般实验中退火温度比扩增引 物的熔解温度 Tm 低 5℃,退火时间一般为 30~60 秒,足以使引物与模板之间*结 合,长时间退火没有必要。
即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
tetranor-PGEM (25 ug) 9,15-dioxo-11α-hydroxy-13,14-dihydro-2,3,4,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin E Metabolite; tetranor-PGEM
Prednisolone Phosphate (sodium salt) (1 g) Disodium Prednisolone 21-Phosphate; 11β,17-dihydroxy-21-(phosphonooxy)-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt
一水*(100GM) Sodium Phosphate, Monobasic, Monohydrate, USP Grade; 10049-21-5; Formula:NaH2PO4
Arctigenin (50 mg) (3R,4R)-4-[(3,4-dimethoxyphenyl)methyl]dihydro-3-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-2(3H)-furanone; Arctigenin
DAF-2 (250 ug) 2-(3,6-dihydroxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein; DAF-2
Phosphate Buffered Saline Tablets PBS Tablets
Fluorometric Thiol Detector (300 ul) Fluorometric Thiol Detector
SRT 1720 (1 mg) CAY10559|SIRT 1933; N-[2-[3-(1-piperazinylmethyl)imidazo[2,1-b]thiazol-6-yl]phenyl]-2-quinoxalinecarboxamide
Daidzin (5 mg) 7-(β-D-glucopyranosyloxy)-3-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Daidzoside| NPI 031D; Daidzin
Neutrophil Elastase Inhibitor (10 mg) 1-(3-methylbenzoyl)-1H-indazole-3-carbonitnile
AM694 N-pentanoic acid metabolite (1 mg) 5-(3-(2-iodobenzoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; AM694 N-pentanoic acid metabolite
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 1 kDa
Arachidonoyl Ethanolamide-d8 (1 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide-5,6,8,9,11,12,14,15-d8; AEA-d8|Anandamide-d8; Arachidonoyl Ethanolamide-d8
TNP-470 (25 mg) AGM-1470|NSC 642492|O-(Chloroacetyl-carbamoyl) Fumagillol; (3R,4S,5S,6R)-5-metxoxy-4-[(2R,3R)-2-metxyl-3-(3-metxyl-2-buten-1-yl)-2-oxiranyl]-1-oxaspiro[2.5]oct-6-yl ester N-(2-chloroacetyl)-carbamic acid
iFluor 700 马来酰亚胺 iFluor 700 maleimide
2-Ami-pxenylbutane (xy7nochloride) (1 mg) α-etxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; AEPEA|Butanpxenamine|α-etxylpxenetxylamine; 2-Ami-pxenylbutane (xy7nochloride)
MEDICA 16 (5 mg) 3,3,14,14-tetrametxylhexadecanedioic acid; MEDICA 16
(1aR, Ingenol
ModifiedCamp-BAPAgaradditiveA
*麦康凯琼脂基础(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 用于大肠杆菌O157的分离培养
乙酰胺琼脂 Acetamide Agar 250 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
碱性琼脂250g/瓶用于霍乱弧菌的选择性分离incubationmedia碱性琼脂250g/瓶用于霍乱弧菌的选择性分离
M肉汤 10ml*20支/包 用于干燥食品和种子中沙门氏菌增菌培养
吖啶黄素5mg*5添加于200mlHB成LB2
高渗真菌学琼脂 Osmophilic Mycophile Agar 用于高渗食品中酵母菌和霉菌检测
葡萄糖蛋白胨培养基 Dextrose Peptone Medium 250克 生物制品无菌试验
*琼脂基础250g/瓶用于炭疽杆菌的荚膜培养,每88ml培养基中添加无菌氢钠溶液incubationmedia*琼脂基础250g/瓶用于炭疽杆菌的荚膜培养,每88ml培养基中添加无菌氢钠溶液
消毒液中和肉汤 250g 用于中和醇类、酚类消毒剂、含氯消毒剂
即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL图片琼脂培养基J250g用于沙门氏菌选择性分离培养
Antibiotic agar No.5 GROVE and RANDALL medium No.5抗生素琼脂5号 1.05271.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar No.5 GROVE and RANDALL medium No.5抗生素琼脂5号 1.05271.0500 MERCK默克
牛津琼脂基础 100g 用于单核增生李斯特氏菌的选择性分离(SN0184-2005)。
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