辅酶ⅠNAD（H）含量测试盒50管/24样规格

我公司提供的辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格方法分类：紫外分光光度法、可见分光光度法、微量法、酶法、高效液相色谱法本方法提供代测服务!咨询！
产品名称：​辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格
规格：50管/24样 测试方法：可见分光光度法

测定意义

辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。

测定原理

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格成及试剂配制
1：预包被板: 96T/48T
2：酶标记抗体: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3：标准品: -6 0.5mL x 2
4：EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5：标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6：显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7：终止液: 1N 12mL x 1
8：浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。 注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸*拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。

辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免*孔与Z后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响 实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商， 如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    BR，98%    131-48-6    保存：-20℃            500毫克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    1克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，    5克        ，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名称： N-乙酰-神经氨酸 其他中文名称： 唾液酸；N-乙酰基神经氨酸；醋纽拉酸；N-乙酰甘露糖胺丙酮酸；N-乙酰涎酸；氧-唾液酸；N-乙酰-神经氨(糖)酸 英文名称： NANA 其他英文名称： N-Acetyl-Neuraminic；Sialic acid 产品规格： BR,98% 包装：100毫克/500毫克/1克/5克/25克号：131-48-6C11H19NO9=309.27级别：BR含量：≥98.0%溶解性：50mg/ml,clear colorless性状：结晶粉末。比旋光度-32° (c=2,water)。溶于水，微溶于乙醇。熔点：184-186 ℃用途：生化研究。唾液酸是广泛存在于自然界中的碳水化合物，也是许多糖蛋白、糖肽和糖脂的基本组成部分，具有广泛的生物功能，如血蛋白半衰期的调节、多种毒素的中和、细胞粘附、免疫的抗原抗体反应和对细胞溶解的保护。在糖蛋白或糖脂质中，由于2位的酮基形成糖苷键而使它位于糖侧链的非还原性末端，其阴电荷或*的化学结构使其具有各种生理HPLC≥98%，20mg/vial    23513-15-7    10-姜酮醇    10- Jiang Tongchun
HPLC≥98%,20mg/vial    23513-08-8    8-姜辣醇    8- ginger?spicy alcohol
HPLC≥98%，20mg/vial    23513-14-6    6-姜酚    6-?Gingerol
HPLC≥98%，20mg/vial    20831-76-9    龙胆苦苷    Gentiopicroside
HPLC≥98%，20mg/vial    529-59-9    染料木苷    Genistein
HPLC≥98%，20mg/vial    446-72-0    金雀异黄酮    Genistein
HPLC≥98%，20mg/vial    27741-01-1    京尼平苷酸    Geniposidic acid
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样规格HPLC≥98%，20mg/vial    24512-63-8    京尼平甙    Geniposide
HPLC≥98%，20mg/vial    6902-77-8    京尼平    Genipin
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HPLC≥98%，20mg/vial    62499-27-8    *    Gastrodin