MSU440 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器

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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

shēng huà shì jì 酒石酸钾钠 容量： RT 500克

shēng huà shì jì 酒石酸钾 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 酒石酸二钠 容量： RT 500克

shēng huà shì jì 酒石酸铵 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 酒石黄 容量： 1克

shēng huà shì jì 井冈霉素 容量： 5克

shēng huà shì jì 精胺 容量： 保存：-20℃ 1毫克

shēng huà shì jì *脱羧酶试验培养基 容量： RT 10克

shēng huà shì jì *肉汤 容量： 500克

shēng huà shì jì *琼脂糖凝胶4B 容量： 1克

shēng huà sh

T/96T48T/96T

 sTLR6 大鼠可溶性Toll样受体6 规格： 48T/96T

 MSU440 感受态细胞 100ul*10sTLR2 大鼠可溶性Toll样受体2 规格： 48T/96T

 sP-selectin 大鼠可溶性P选择素 规格： 48T/96T

 sE-selectin 大鼠可溶性E选择素 规格： 48T/96T

 Gzms-B 大鼠颗粒酶B 规格： 48T/96T

 Gzms-A 大鼠颗粒酶A 规格： 48T/96T

 EMAb 大鼠抗子宫内膜抗体 规格： 48T/96T

 pANCA 大鼠抗中性粒细胞核周抗体 规格： 48T/96T

 ACA 大鼠抗中性粒/中心体抗体 规格： 48T/96T

 PCNA 大鼠抗增殖细胞核抗原抗体 规格： 48T/96T

 AT 大鼠抗* 规格： 48T/96T

 PA-IgG/M/A 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A 规格： 48T/96T

 ACA-IgM 大鼠抗心磷脂抗体IgM 规格： 48T/96T

 ACA-IgG 大鼠抗心磷脂抗体IgG 规格： 48T/96T

葡萄糖斜面琼脂 容量： 2～8℃ 100毫升

shēng huà shì jì 金属硫蛋白 容量： 5克

shēng huà shì jì 金丝 容量： 100克

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。