Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养

Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。 
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今为止，公司收录背景资料清晰，细胞活力状态良好的细胞株1420株，其中绝大部分是近年来从美国ATCC和NIH分批引进的细胞种子，少部分来自全国各地细胞研究所，细胞来源可靠，背景资料清晰，代数年轻，活力好。冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。

细胞名称  Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养
形态特性   上皮样
生长特性  　贴壁生长
特征特性    该细胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件  　MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法   消化3-5分钟；1:2传代；3天内可长满。
传代情况  C3
冻存条件  *培养基+8%DMSO　
支原体检测  阴性　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色体

使用权限 A类 
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0124IMR-32(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2

人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL

COC1/CDDP细胞，人卵巢癌*耐药株 大黄鱼肾细胞,PCK细胞 脐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2

HTSMC Pellet 人类气管平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人脐静脉平滑肌细胞裂解物HUVSMCL
小鼠神经干细胞 Mouse

CM-M043小鼠小肠平滑肌细胞*培养基100mL

人晶状体上皮细胞 (HLEpiC)( 5×105 )

小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino 小鼠颌下腺上皮细胞*培养基 100mL

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人细胞裂解液 (阳性对照)
非洲绿猴肾细胞;BS-C-1

人骨骼肌成肌细胞(HSkMM)(5×105)

CL-0227T-24(人膀胱癌细胞)5×106cells/瓶×2

人膀胱癌细胞;5637(HTB-9) 大鼠神经元细胞*培养基 100mL

N-H 小鼠骨髓瘤淋巴细胞

LYPD3 Others Human 人 LYPD3 / MIG-C4 人细胞裂解液 (阳性对照)
四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)250g用于沙门氏菌选择性增菌培养，需加入煌绿和液

BYP琼脂培养基 250g 用于巴氏杆菌分离培养

动力-吲哚-尿素培养基基础(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250 用于细菌的复合生化试验

哥伦比亚血琼脂基础250g/瓶广泛用于细菌，尤其是弯曲杆菌、链球菌等苛养菌的培养，每培养基中添加5ml~5070ubationmedia哥伦比亚血琼脂基础250g/瓶广泛用于细菌，尤其是弯曲杆菌、链球菌等苛养菌的培养，每培养基中添加5ml~50701

BismuthSulfiteAgar
亚利桑那菌琼脂(SA)2300g用于亚利桑那菌选择性分离培养。(SN02)

2号麦康凯琼脂(CM0109) Oxoid incubation media 2号麦康凯琼脂(CM0109) Oxoid

普雷恩毛霉 强化酵淀粉糖化液，酒精及白酒酵母 支/瓶

NutrientBroth

连四盐培养基 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。
Cas9稳定表达的人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B-Cas9-586培养液体硫乙醇酸盐培养基250g用于药品，生物制品无菌试验，培养菌、厌气菌(GB标准)

马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA) 250(g) incubation media 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA) 250(g)

肠道菌增菌液 Enterobacteria Enrichment Broth 250克 肠道菌的增菌培养

氯多粘菌素B肉汤基础(SCPB)250用于副溶血性弧菌选择性增菌培养，用前应无菌加入多粘菌素B(SN标准)incubationmedia氯多粘菌素B肉汤基础(SCPB)250用于副溶血性弧菌选择性增菌培养，用前应无菌加入多粘菌素B(SN标准)

缓冲蛋白胨水(BPW) 250g 用于沙门氏菌前增菌培养，亦可用于李氏菌前增菌培养(GB、SN标准)

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