服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA检测试剂盒 |
英文名称 | Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit |
货号 | YS-H11753 |
试剂配制
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
BCL6B抗体 规格: 0.1ml 英文名称:BCL6B
人β亚基人绒毛膜促性激素(β HCG)抗体 规格: 0.1ml 英文名称:hCG beta
磷酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Phospho-BLNK (Tyr96)
乳癌相关蛋白1抗体 规格: 0.1ml 英文名称:B1
BRD3蛋白抗体 规格: 0.2ml 英文名称:BRD3
9号染色体开放阅读框30抗体 规格: 0.2ml 英文名称:C9orf30
10号染色体开放阅读框132抗体 规格: 0.2ml 英文名称:C10orf132
唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:CLPTM1
17号染色体开放阅读框74抗体 规格: 0.2ml 英文名称:C17orf74
CD40L抗体 规格: 0.1ml 英文名称:CD40L
细胞质连接蛋白1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:CLIP170
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 规格: 0.1ml 英文名称:phospho-c-ABL (Tyr115)
22号染色体开放阅读框26抗体 规格: 0.2ml 英文名称:C22orf26
钙调蛋白结合转录激活因子1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:CAMTA1
人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA检测试剂盒小鼠促泌素(SCGN)ELISA试剂盒 英文名: SCGN ELISA Kit
小鼠刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)ELISA试剂盒 英文名: HHIP ELISA Kit
小鼠次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)ELISA试剂盒 英文名: HPRT1 ELISA Kit
小鼠雌激素受体α(ERα)ELISA试剂盒 英文名: ERα ELISA Kit
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒 英文名: ADCYAP1 ELISA Kit
小鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒 英文名: PRF1 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)ELISA试剂盒 英文名: FGFR3 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒 英文名: FGFR1 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒 英文名: FGF7 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子3(FGF3)ELISA试剂盒 英文名: FGF3 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒 英文名: FGF23 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子18(FGF18)ELISA试剂盒 英文名: FGF18 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子15(FGF15)ELISA试剂盒 英文名: FGF15 ELISA Kit
操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。