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产品名称 | 兔胰腺星状细胞 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97192 |
商品属性：
名称 兔胰腺星状细胞 2.组织来源：胰腺组织 3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介： 兔胰腺星状细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星状细胞（PSC）是胰腺纤维化的主要效应细胞，PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴，并表达Desmin蛋白，活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）。PSC具有静息态与激活态两种，并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的A脂滴可以被油红O染成红色，阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现，原代分离的细胞培养6d，胞浆中仍可见明显的脂滴，传代后，橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示，细胞接种24h仍然表达Desmin，48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA，随着培养时间的增长和传代次数的增加，细胞表达alpha-SMA，而不再表达Desmin，说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程，至培养第6d大多数细胞激活，传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型，目前研究发现：胰腺受损时，在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化，导致细胞形态、功能发生变化，促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。 5.方法简介： ()实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测： ()实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息： 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-Rb048 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态成纤维细胞样 传代特性可传3-5代 消化液0.25% 培养条件气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)免疫试剂盒现货供应
大鼠胰高血糖素样肽2(Glp-2)免疫试剂盒*直销
大鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体免疫试剂盒*直销
大鼠α葡萄糖苷(a-Glu)免疫试剂盒*直销
蜥蜴雌二醇(E2)免疫试剂盒现货供应
Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂） 英文名称：Pfizer Enterococcus Selective Agar 产品规格：250g
采样吸取液1-GVPC液体培养基添加剂 英文名称： 产品规格：1ml*3支/管
B5培养基 英文名ows\system32\EhStorShell.dll
兔胰腺星状细胞Yersinia pestis鼠疫耶尔森(鼠疫杆)探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周CCDC146 卷曲螺旋结构域蛋白146抗体 规格: 0.2mlEMR1 表皮生因子样激素受体1 规格: 0.2ml
Fructus viticis蔓荆子探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周phospho-IRS1(Ser789) 磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1mlMorphine 啡抗体 规格: 0.2ml
Trypanosoma vivax活动锥虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周MMP19 基质金属蛋白18/19 规格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1ml
Streptomyces spp.链霉通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周NUCKS1 核酪蛋白激和细胞周期蛋白依赖性激底物1抗体 规格: 0.2mlTSSK6/CT72 睾特异丝/苏激6抗体 规格: 0.2ml
Influenza Virus A甲型流感（）病毒H5N8亚型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-4周ORP4/OSBP2 氧化固醇结合蛋白4抗体 规格: 0.2mlCD66a/CEACAM1 胚抗原相关细胞粘附分子1抗体 规格: 0.2ml
蛇源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周G-CSFR/CD114 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3受体抗体 规格: 0.1mlJUP/Cateninma γ γ连环蛋白抗体（Catenin γ ， γ链接素） 规格: 0.2ml
Sporothrix schenckii申克孢子细探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周MAPK11/p38Beta 丝裂原活化的蛋白激p38β抗体 规格: 0.1mlCeruloplasmin 铜蓝蛋白抗体 规格: 0.1ml
Potato witches’ broom phytoplasma马铃薯丛枝植原体PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-rat IgG/Gold 胶体金标记的羊抗大鼠IgG 规格: 0.5mlphospho-PI3KCA(Tyr317) 磷酸化磷脂酰肌醇激催化亚单位A抗体 规格: 0.1ml
Rhizoma phragmitis芦根PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周LH beta 促黄体生成素抗体 规格: 0.1mlIL-6 白介素6抗体 规格: 0.1ml
Cooperia punctata匙形古柏线虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Bcl-6/5 原基因Bcl-6抗体 规格: 0.2mlFCAR/CD89 免疫球蛋白A Fc段受体1抗体 规格: 0.1ml
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
