产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
可见分光光度法 | 50管/24样 | BJ-01S10201 |
商品介绍:
测定意义:
多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一种细胞壁结合蛋白,可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,参与果胶的降解,使细胞壁结构解体,导致果实软化,与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御,细胞伸展发育以及木质化有关,在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。
测定原理:
多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与DNS试剂反应生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
小鼠 FGF18 基因全长ORF克隆
小鼠 ARTN 基因全长ORF克隆
小鼠 TNFSF12 基因全长ORF克隆
小鼠 ACVR2B 基因全长ORF克隆
小鼠 HBEGF 基因全长ORF克隆
小鼠 RBP4 基因全长ORF克隆
小鼠 TMEFF2 基因全长ORF克隆
小鼠 GFRA2 基因全长ORF克隆
小鼠 SERPINF2 基因全长ORF克隆
小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全长ORF克隆
多聚半乳糖醛酸酶测试盒50管/24样大鼠5-羟色胺转运体(5-HTT/SERT)免疫试剂盒现货供应
大鼠5羟色胺(5-HT)免疫试剂盒*直销
大鼠5羟基乙酸(5-HIAA)免疫试剂盒进口、组装
大鼠5羟二十碳四烯酸(5-HETE)免疫试剂盒进口、分装
大鼠5'-核苷酸,胞膜(NT5E/CD73)免疫试剂盒现货供应
大鼠5核苷酸(5-NT)免疫试剂盒*直销
大鼠5'-AMP活化蛋白激α-2催化亚基(PRKAA2)免疫试剂盒进口、组装
大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒进口、分装
大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)免疫试剂盒现货供应
大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)免疫试剂盒*直销
大鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)免疫试剂盒进口、组装
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。