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ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作，必能得出准确的实验结果，可提供免费技术咨询服务！
产品名称 | Apo-E人载脂蛋白EELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human Apolipoprotein E, Apo-E Elisa Kit |
货号 | FS-H63712 |
公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
Shewanella│basaltis 玄武岩希瓦氏菌Shewanella│basaltis分离基物:样/表层海冻干物安全等级:1模式菌株:no潜在的有机污染物降解菌/分离自代十六烷富集菌群821生长条件:4℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：94%
Rahnella│aquatilis 生拉恩氏菌Rahnella│aquatilis分离基物:样/表层海冻干物模式菌株:no潜在的有机污染物降解菌/分离自石油富集菌群，单菌无降解能力。1001生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：94%
Polaribacr│sp. 地杆菌Polaribacr│sp.分离基物:样/上层海冻干物安全等级:1模式菌株:no潜在的有机污染物降解菌/分离自石油污染海域菌群471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：94%
Fictibacillus│nanhaiensis 南海芽孢杆菌Fictibacillus│nanhaiensis分离基物:样/底层海斜面培养物安全等级:1模式菌株:no深海细菌14生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：99%
Pseudomonas│taiwanensis 中国台湾假单胞菌Pseudomonas│taiwanensis分离基物:土壤/椰子树腐烂芯覆土冻干物安全等级:1模式菌株:no近海细菌471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：99%
Pseudomonas│mosselii 摩氏假单胞菌Pseudomonas│mosselii分离基物:土壤/浴场海滩沙冻干物安全等级:1模式菌株:no近海细菌471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：average Mn ~2,000
Vibrio│azureus 远青弧菌Vibrio│azureus分离基物:生物样/海滩腐海草冻干物安全等级:1模式菌株:no近海细菌471生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：97%
Falsibacillus│pallidus 白色假芽孢杆菌Falsibacillus│pallidus分离基物:土壤/椰子树腐烂芯覆土冻干物安全等级:1模式菌株:no近海细菌33生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：96%
Apo-E人载脂蛋白EELISA试剂盒实验原理Phospho-p90RSK (Thr573) 磷化丝氨/苏氨激酶p90RSK蛋白抗体五加皂苷B2-溴二苯并噻吩Human PTPN6 (Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 6) ELISA Kit
VIP receptor II 腺苷环化酶激活肽受体-II/血管活性肠肽受体-II抗体紫丁香酚苷(S)-(+)-香芹Human MGMT (O-6-Methylguanine DNA Methyltransferase) ELISA Kit
PACAP R1/VIP receptor-I 腺苷环化酶激活肽受体-I抗体五加苷E(S)-(+)-香芹Human PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit
PACAP-27/38 腺苷环化酶激活肽-27/38抗体竹节香附素ARetapamulinHuman PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit
PACAP-38 腺苷环化酶激活肽-38抗体注:五加叶中3,5--1-苯Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
PADI4 关节炎相关基因抗体柴胡皂苷A3,5--1-苯Human FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit
PAF 血板活化因子抗体柴胡皂苷CBenfotiamineHuman FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit
PALB2 癌易感基因相关蛋白2柴胡皂苷D4-(2-噻唑基偶氮)间苯二酚Human Pg (Progesterone) ELISA Kit
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
