人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C培养美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
细胞名称 人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C培养
形态特性 內皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞可用于血管内皮修复损伤的研究。
培养条件 F12K 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C17
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR 鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C培养注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
本公司提供的都是活性的新鲜细胞,具体详情可,来电可享受*!
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicasin / NCSTN 人细胞裂解液 (阳性对照)
直结肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大鼠肠巨噬细胞*培养基 100mL
R 1610仓鼠肺细胞 R 1610 hamster lung cells DMEM+10%FBS
FGF10 Protein Human 重组人 FGF10 蛋白
Chang liver (CCL13) (人张氏肝细胞) 5×106cells/瓶×2 人心脏微血管内皮细胞HCMEC
Caki-2 人透明细胞癌细胞 1ml/T75
786-O 人透明细胞癌细胞 1ml/T75
Caki-1 人透明细胞癌皮肤转移细胞 1ml/T75
SW-13 人上腺皮质癌细胞 1ml/T75
大鼠骨髓瘤细胞;IR983F
人胚肾二倍体细胞;HEK-2
GST Others Schistosoma japonicum 日本血吸虫 Glutathione S-ansferase / GST 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
EL4. IL-2细胞,淋巴瘤细胞 人结肠癌细胞,Loo细胞 CM-H037人结肠平滑肌细胞*培养基100mL
间充质干细胞培养基MSCM-sf
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠CXC趋化因子配体1(CXCL1)ELISA试剂盒 ,英文名: CXCL1 ELISA Kit
鱼类白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒FishIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T
犬组织因子(TF)免疫试剂盒 Canine Tissue Factor,TF ELISA Kit
英文名称MouseCCL11ELISAKit小鼠CCL11规格:96T/48T
冰冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
RatErythropoietin,EPOELISA试剂盒大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒
Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCrosslaps,CrELISA试剂盒人骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织DYRK1A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
humanProstaglandinF,PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C培养小鼠硝基酪酸()ELISA试剂盒 ,英文名: ELISA Kit
兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA检测试剂盒RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit 96T/48T
牛脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒 Bovine lipopolysaccharide binding protein,LBP ELISA kit
英文名称HumanBrainderivedneuroophicfacorELISAKit人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISAKit规格:96T/48T
蛋白样品赖氨酸层析法去内毒素试剂盒20次
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISA试剂盒大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T