ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | FMOD人纤调蛋白ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human fibromodulin, FMOD Elisa Kit |
货号 | FS-H64365 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ) 规格:20mg 英文:TIMP2
再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ) 规格:20mg 英文:TIMP1
再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ) 规格:10mg 英文:CTSZ
再生蛋白1(NEO1) 规格:20mg 英文:CTSW
有机溶质载体伴侣1(OSCP1) 规格:1g 英文:CTSV
存活素(Surv) 规格:20mg 英文:CTSO
存活素(Surv) 规格:20mg 英文:CTSL3
死亡因子4(MORF4) 规格:10mg 英文:CTSL
死亡关联蛋白激酶1(DAPK1) 规格:20mg 英文:CTSK
死亡关联蛋白激酶1(DAPK1) 规格:20mg 英文:CTSG
死亡关联蛋白激酶3(DAPK3) 规格:1g 英文:CTSF
死亡诱导终结因子1(DIDO1) 规格:20mg 英文:CTSD
死亡诱导终结因子1(DIDO1) 规格:10mg 英文:CTSA
死骨片1(SQSTM1) 规格:1g 英文:HAT1
成肌分化蛋白(MyoD) 规格:20mg 英文:HDAC9
Loureirin B雷米普利(标准品) 分子式:C17H14O6 性状:Yellow powder 纯度:98.0%
4,2'-Dihydroxy-4'-methoxychalcone 分子式:C33H40O21 性状:Yellow powder 纯度:98.5%
Glabralide A(标准品) 分子式:C35H36O14 纯度:97.0%
AureusidinN-乙酰神经氨/唾液 分子式:C32H22O10 性状:Yellow powder 纯度:98.0%
Isoliquiritigenin红霉素 分子式:C33H24O10 性状:Yellow powder 纯度:97.5%
Phloretin红霉素(标准品) 分子式:C39H32O14 性状:Yellow powder 纯度:97.0%
Helichrysetin盐多巴酚丁胺 分子式:C21H20O12 性状:Yellow powder 纯度:98.0%
Sappanchalcone羟丙基β环糊精;2-羟丙基-β-环糊精 分子式:C27H30O17 性状:Yellow powder 纯度:98.0%
Robtein羧甲基壳聚糖 分子式:C30H34O5 性状:Yellow powder 纯度:96.0%
铁冬青;毛冬青 Rotundic acid; hairy holly acid 规格:HPLC≥98% 20mg/支
大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷 Emodin -8-O- beta -D- glucoside 规格:HPLC≥98% 20mg/支
洋川芎内酯A Senkyunolide A 规格:HPLC≥98% 20mg/支
洋川芎内酯H Senkyunolide H 规格:HPLC≥98% 10mg/支
洋川芎内酯I Senkyunolide I 规格:HPLC≥98% 10mg/支
正丁基酞 Butyl phthalide 规格:HPLC≥98% 20mg/支
异莲心 Isoliensinine 规格:HPLC≥98% 20mg/支
甲基莲心 Neferine 规格:HPLC≥98% 20mg/支
莲心高盐 Liensinine perchlorate 规格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷AⅢ Timosaponin A III 规格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷B II Saab B II 规格:HPLC≥98% 20mg/支
知母皂苷元;菝葜皂苷元; 菝葜皂甙元 Sarsasapogenin; sarsasapogenine; sarsasapogenin 规格:HPLC≥98% 20mg/支
FMOD人纤调蛋白ELISA试剂盒实验原理巨噬炎性蛋白抗体Porcine PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) ELISA Kit
CD72蛋白抗体Porcine ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit
中心体蛋白128抗体Porcine MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit
着丝粒蛋白O抗体Porcine SDC4 (Syndecan 4) ELISA Kit
3号染色体开放阅读框17抗体Porcine S100A13 (S100 Calcium Binding Protein A13) ELISA Kit
质膜微囊蛋白-2抗体Porcine MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit
磷化质膜微囊蛋白-2抗体Porcine PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit
3号染色体开放阅读框24抗体Porcine IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准