ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | IgG人免疫球蛋白GELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human Immunoglobulin G, IgG Elisa Kit |
货号 | FS-H64279 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
肿瘤/抗原26抗体英文全称Argininosuccinate Synthetase 1英文简称ASS1 检测范围:3044nmol/L-400U/L
肿瘤/抗原20抗体英文全称ELOVL5英文简称ELOVL5 检测范围:8806nmol/L-80ng/mL
肿瘤/抗原2.4抗体英文全称CA153英文简称CA153 检测范围:1115nmol/L-240U/ml
肿瘤/抗原2.3抗体英文全称β-microglobulin英文简称β-MG 检测范围:1114nmol/L-10μg/ml
肿瘤/抗原2.2抗体英文全称Soluble cytokine receptor英文简称sCKR 检测范围:1113nmol/L-2000pg/ml
肿瘤/抗原1B英文全称extractable nuclear antigen英文简称Extractable ANA 检测范围:1652nmol/L-
肿瘤/抗原1B/1A英文全称outer membrane protein A英文简称OmpA 检测范围:2130nmol/L-5000pg/mL
肿瘤/抗原13抗体英文全称cancer antigen 27-29英文简称CA27-29 检测范围:3049nmol/L-100U/mL
Leflunomide 规格:>98.5%,USP31,BR 脑特异性血管生成抑制蛋白1抗体
Leflunomide 规格:HPLC>98%,标准品 Bcl2相关转录因子抗体
LevofloxacinHemihidrated 规格:>98.5%,USP34,BR,可用于培养 BCL2样15促凋亡蛋白抗体
LevofloxacinHemihidrated 规格:HPLC>98%,标准品 BCL2相关X蛋白抗体
Lornoxicam 规格:>99% Bcl2样凋亡蛋白9抗体
Lornoxicam 规格:HPLC>99%,标准品 Bcl2样凋亡蛋白13抗体
LosartanPotassium 规格:>99%,USP,BR,可用于培养 Bcl2样凋亡蛋白14抗体
LosartanPotassium 规格:HPLC>98%,标准品 Bcl2蛋白修饰因子抗体
Masitinib 规格:>98% 骨形态发生蛋白11抗体
脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)酶联免疫试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)酶联免疫试剂盒 Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 aibody,AT2R-Ab ELISA Kit
抗斑疹伤寒抗体(ai-typhus-Ab)酶联免疫试剂盒 ,英文名: ai-typhus-Ab ELISA Kit
Ratisletcellaibody,ICA酶联免疫试剂盒胰岛抗体(ICA)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MM酶联免疫试剂盒糖原化酶同工酶MM(GP-MM)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
HumanKallikrein10,KLK10ELISAKit激肽释放酶10(KLK10)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
犬血栓调节蛋白(TM)酶联免疫试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
山羊过氧化氢酶(CAT)酶联免疫试剂盒 Goat Catalase,CAT ELISA kit
内皮素1(ET-1)酶联免疫试剂盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit
Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TG酶联免疫试剂盒β血板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
HumanBromodeoxyuridine,BrdU酶联免疫试剂盒溴脱氧核苷尿嘧(BrdU)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)酶联免疫试剂盒规格:96T/48T
IgG人免疫球蛋白GELISA试剂盒实验原理磷化周期检测点激酶2抗体10-(1-萘基)蒽-9-Porcine PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit
磷化周期检测点激酶2抗体2,4-二-5-硝基苯Porcine CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit
磷化周期检测点激酶2抗体2,4-二-5-硝基苯Porcine PRSS8 (Protease, Serine 8) ELISA Kit
遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白抗体4-溴-3-(基)苯甲Porcine PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白样抗体4-溴-3-(基)苯甲Porcine BCAN (Brevican) ELISA Kit
腺癌标志物CHMP2A抗体5-硝基-8-羟基喹啉Porcine TM (Thrombin) ELISA Kit
染色质修饰蛋白CHMP6抗体5-硝基-8-羟基喹啉Porcine PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit
染色质修饰蛋白CHMP5抗体5-硝基-8-羟基喹啉Porcine KLK6 (Kallikrein 6) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准