实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
卡萨诺尔森林病病毒PCR荧光定量检测试剂盒 | Kyasanur Forest Disease Virus(KFDV)RTPCR | 多种规格 | BJ-P6915 |
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 | 三、注意事项 １．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。 ２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。 ３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 ４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。 ５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。 ６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。 ７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
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操作流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
1 管 DH5α大肠杆菌 DH5α E.coli Strain -80℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 2
2 ug pGL4.26[Luc2P/minP/Hygro] pGL4.26[Luc2P/minP/Hygro] 低温运输，-20℃保存
20只/袋 口腔拭子（医用简装） 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4
2 ug pTRE3G pTRE3G 低温运输，-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human CD44 antigen
NBB培养基 NBB Agar 250g进口、国产250克
1mL 2X PCR Mix（即用型PCR试剂盒3.0） Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人同种异体移植炎症因子1(AIF-1)ELISA试剂盒
1瓶 HO-8910株 HO-8910 低温运输和保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Methylenetetrahydrofolate reductase
1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0 Tris Buffered Saline(TBS),10X),pH8.0 常温保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Cytochrome b5
100mL RNase-Free Potassium Acetate Solution（无RNase的乙酸钾溶液）,8M RNase-Free Potassium Acetate Solution,8M 常温保存 1.56-100 U/L ELISA Kit for Human N-acetyl-beta-D-glucosaminidase
48 T 胺测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存3.5% NaC1发酵管进口、国产3.5% NaC1发酵管20支BR
100mL CHES Buffer,0.5M,pH10.0 CHES Buffer,0.5M,pH10.0 常温保存 1.56-100 U/mL 人髓白血病-1(MCL-1)ELISA试剂盒
卡萨诺尔森林病病毒PCR荧光定量检测试剂盒Zebularine DNA甲基转移酶抑制剂(胞苷脱氨酶抑制剂)(Zebularine) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Forodesine hydrochloride 嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂(PNP抑制剂)(Forodesine盐酸盐) 1mL(10mM)|1000ug|2500ug|5mg|10mg
GSK2879552 LSD1抑制剂(GSK2879552) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
GDC-0853 BTK抑制剂(GDC-0853) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
SGI-1027 DNA甲基转移酶抑制剂(DNMT抑制剂) 1mL(10mM)|10mg|50mg
PLX-4720 B-RafV600E抑制剂(PLX-4720) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
THZ2 CDK7抑制剂(THZ2) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Pomalidomide TNF-α释放抑制剂(Pomalidomide) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
2-Methoxyestradiol 微管聚合和HIF-1抑制剂 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
GSK2334470 PDK1抑制剂(GSK2334470) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
VLX1570 DUBs抑制剂(VLX1570) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
