操作流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
猪等孢球虫通用PCR荧光定量检测试剂盒 | Isospora suisPCR | 多种规格 | BJ-P6899 |
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 | 三、注意事项 1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。 2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。 3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。 5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。 6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。 7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
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2 ug pCMV-HA pCMV-HA 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人肿瘤坏死因子超家族成员10A(TNFRSF10A )ELISA试剂盒
20次 蛋白质电泳分子量标准(14.4-97.4 KD) Protein Marker -20℃保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Serum paraoxonase/arylesterase 1
1瓶 MCF 7B株 MCF 7B 低温运输和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Delta-aminolevulinic acid dehydratase
100g 马来酸 Maleic Acid 室温密封保存 0.156-10 ng/mL 人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒
2 ug pOTB7 PPP2R4 pOTB7 PPP2R4 低温运输,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人CD5分子样蛋白(CD5 antigen-like)ELISA试剂盒
2 ug pAAV-RC pAAV-RC 低温运输,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人脂阀结构蛋白-1(Flotillin-1) ELISA试剂盒
50T 牛特定基因序列PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人Mdm2结合蛋白ELISA试剂盒
1.5mL 高GC DNA清除剂,PCR级 High GC DNA Erasol 常温
50 T 抑制与产生超氧阴离子自由基测试盒(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存进口、国产25克
2 ug pMIG-Aalpha E64G pMIG-Aalpha E64G 低温运输,-20℃保存酵母浸膏进口、国产Yeast extract500克BR
发光菌培养基 photobacterium Medium 250g
猪等孢球虫通用PCR荧光定量检测试剂盒Carboplatin 细胞修复抑制剂(Carboplatin) 1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
Entrectinib Trk/ROS1/ALK抑制剂 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Colchicine tubulin抑制剂(微管干扰剂) 1mL(10mM)|200mg|500mg
EX-527 SIRT1抑制剂(EX-527) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
LGK974 Porcupine抑制剂(LGK974) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
10058-F4 c-Myc抑制剂(10058-F4) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Vandetanib VEGFR2抑制剂(Vandetanib) 1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg|500mg
Vismodegib hedgehog抑制剂(Vismodegib) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
FK866 酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂(nMPRTase抑制剂)(FK866) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
BLZ945 CSF-1R抑制剂(BLZ945) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
GDC-0994 ERK激酶抑制剂(GDC-0994) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg