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产品名称 | 英文名称 | 规格 |
大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书 | Rat transferrin receptor/TRFR ELISA Kit | 48T/96T |
大鼠转铁蛋白受体 TRFR Elisa KitRat transferrin receptor/TRFR ELISA Kit
大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书TRFR，转铁蛋白受体（transferrin receptor）。转铁蛋白受体(TfR)是一种细胞膜受体，也是一种跨膜糖蛋白。主要在调节细胞铁的摄取中发挥关键作用。正常人80%以上的TfR存在于骨髓红系细胞上，红系各阶段细胞所表达的TfR数随红细胞的成熟而减少。原红细胞上可有800,000个TfR，到网织红细胞逐渐减少。原红细胞上可有100,000个，成熟红细胞上则无TfR。sTfR的数目可反映体内铁的利用状况，在铁代谢正常时亦可反映骨髓红系的增情况，故在缺铁性贫血、溶血性贫血时sTfR是增高的，而在再生障碍性贫血及慢性病贫血，sTfR是减少的。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
试剂配制:
1、大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注意事项：
1加样：
①大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
现货供应 二羰基/L-木酮糖还原酶(DCXR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 二磷酸甘油酸变位酶(BPGM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 二磷酸腺苷(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 丁酰胆碱酯酶(BCHE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 丁酰胆碱酯酶(BCHE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 十四烷基化丙氨酸丰富蛋白激酶C底物(MARCKS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 连接蛋白2(JPH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 连接蛋白3(JPH3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 连接蛋白4(JPH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 连续蛋白(TELE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 围脂滴蛋白1(PLIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 围脂滴蛋白3(PLIN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 肿瘤坏死因子受体超家族成员8(TNFRSF8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
现货供应 蛋白激酶Cθ(PKCθ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格： 48T/96T
大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书SYBR Green I(PCR级，10000X)50ul支
革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒100T盒
羊抗人IgM-HRP0.1ml支
考马斯亮蓝快速染色液500ml瓶
大鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒200ml/KIT盒
(-)-Gallocatechin gallate-GCG 没食子儿茶素没食子酸酯4233-96-920mg
Proanthocyanidins 原花青素4852-22-620mg
Hydroxysafflor yellow A 羟基红花黄色素A78281-02-420mg
Cryptochlorogenic acid 隐绿原酸905-99-720mg
Xylopentaose 木五糖49694-20-410mg
Disodium 5'-Inosinate 5'-肌苷酸二钠4691-65-020mg
L-Methionine L-蛋氨酸-硫氨酸63-68-3200mg
尼龙膜(0.45um)30cm×3m卷
p-NPP 对硝基磷酸二钠盐5g瓶
Polyethylene-polypropylene glycol 407 泊洛沙姆407100g瓶
Gelatin Sepharose 4FF 明胶-琼脂糖凝胶 4FF25mL瓶
PNPG 对硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷1g瓶
Rhodamine B 罗丹明 B25g瓶
操作步骤：
1）大鼠转铁蛋白受体 TRFRElisa Kit说明书运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
9）在450nm波利益测定各孔的OD值。
