肠道病毒EV71核酸检测试剂盒图片品牌

组成及试剂配制:
1、肠道病毒EV71核酸检测试剂盒图片品牌酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

CRAT/CAT1 ELISA Kit活化转录因子3抗体肉毒碱O-乙酰基转移酶(CRAT/CAT1)ELISA试剂盒

lyso-PAF ELISA Kit血管紧缩素样蛋白1抗体溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA试剂盒

Hc ELISA Kit自噬相关蛋白7抗体溶血补体(Hc)ELISA试剂盒

HLAMP-2 ELISA Kit炭疽毒素受体2抗体溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒

LZM ELISA Kit自噬相关蛋白4C抗体溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒

β-HCG ELISA Kit自噬蛋白5/细胞凋亡的特异性蛋白抗体绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)ELISA试剂盒

β-CG ELISA Kit芳基硫酸酯酶A抗体绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒

HCG ELISA Kit拟南芥ACA11抗体绒毛膜促性腺激素(HCG)ELISA试剂盒

PAPP-A ELISA KitAHA3抗体相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒

PAPP-A ELISA Kit磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体相关蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒

PSPB ELISA Kit磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体特异性蛋白B(PSPB)ELISA试剂盒

PSG4 ELISA Kit中性胆固醇酯水解酶1抗体特异性β1糖蛋白4(PSG4)ELISA试剂盒

SP1/PSβ1-G ELISA Kit人星形胶质细胞抗体特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒

HG ELISA Kit醛缩酶A抗体疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒

HSF-1 ELISA Kit膜粘连蛋白6抗体热休克因子1(HSF-1)ELISA试剂盒

HSP gp96 ELISA Kitβ淀粉样肽抗体热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒

HSP-90 ELISA Kit血管紧张素I抗体热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒

HSP-72 ELISA Kit肾上腺髓质素抗体热休克蛋白72(HSP-72)ELISA试剂盒

HSP72 ELISA KitADP核糖基化因子结合蛋白2抗体热休克蛋白72(HSP72)ELISA试剂盒

HSP-70 ELISA Kit精氨酸加压素受体2抗体热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒

HSP70 ELISA Kit凋亡相关斑点样蛋白ASC抗体热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒

Hsp-60 ELISA Kit丝状肌动蛋白结合蛋白抗体热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒

HSP60 ELISA Kit抗凝血酶3抗体热休克蛋白60(HSP60)ELISA试剂盒

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。