DH5α 感受态细胞100ul*20-生命科学仪器

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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

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RRM2B MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit ABI基因家族成员3结合蛋白抗体 人 RRM2B / P53R2 ELISA配对抗体 主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒

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CD86 MVP ELISA Kit 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配对抗体 主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒

CD209B Ntn4 ELISA Kit 乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体 小鼠 SIGNR1 / CD209b ELISA配对抗体 轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒

IL1B Ntn1 ELISA Kit 轴抑制蛋白2抗体 人 IL-1 beta / IL1B / IL-1F2 ELISA配对抗体 轴突生长诱向因子1(Ntn1)ELISA试剂盒

F9 CDK-7 ELISA Kit 血管生成素相关蛋白6抗体 人 Coagulation Factor IX / FIX / F9 ELISA配对抗体 周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISA试剂盒

FCGR2A CDK5 ELISA Kit Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体 食蟹猴 CD32a / Fc gamma RIIA / FCGR2A ELISA配对抗体 周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA试剂盒

CD44 CDK-4 ELISA Kit *蛋白激酶受体A8抗体 人 CD44 ELISA配对抗体 周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒

CR2 CDK-2 ELISA Kit 脂肪酰*家族成员1抗体 人 CD21 ELISA配对抗体 周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISA试剂盒

CD19 CDK-1 ELISA Kit 芳香烃受体核转录蛋白样2抗体 人 CD19 ELISA配对抗体 周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒

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FAS TAF ELISA Kit 肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体 人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 ELISA配对抗体 肿瘤血管生长因子(TAF)ELISA试剂盒

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DH5α 感受态细胞100ul*20PLXDC1 TSTA ELISA Kit 激活素受体相互作用蛋白1抗体 人 TEM7 / PLXDC1 ELISA配对抗体 肿瘤特异性移植抗原(TSTA)ELISA试剂盒

SEMA4D TSGF ELISA Kit 醛固酮类还原酶家族7成员A2抗体 小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配对抗体 肿瘤特异性生长因子(TSGF)ELISA试剂盒
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。