Anti-p57 Kip2抗体,周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体
规格:100ul,200ul,1mg
宿主:兔,鼠,羊
Ig类型:IgG
克隆类型:单克隆/多克隆
标记物:无标记物.
需要标记抗体,可咨询客服订购。相关标记抗体:HRP标记抗体,Biotin标记抗体,Gold标记抗体,RBITC标记抗体,AP标记抗体,FITC标记抗体,Cy3标记抗体,Cy5标记抗体,Cy5.5标记抗体,Cy7标记抗体,PE标记抗体,PE-Cy3标记抗体,PE-Cy5标记抗体,PE-Cy5.5标记抗体,PE-Cy7标记抗体,APC标记抗体,Alexa Fluor 350标记抗体,Alexa Fluor 488标记抗体,Alexa Fluor 555标记抗体,Alexa Fluor 647标记抗体
浓度 :1mg/ml
纯化方式:抗原特异性亲和纯化
缓冲液成分:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
应用: WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。具体适用的实验和针对的物种请来电或99咨询。公司提供Elisa实验配对抗体抗原,需要请电询或99咨询。
产品稀释比例:ELISA=1:1000,Western blotting=1:500,IF=1:100-50,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,Immunohistocry=1:100-500
Optimal working dilutions must be determined by end user.
保质期:1年
储存温度:-20℃(避免反复冻融)
Anti-p57 Kip2抗体,周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体
蛋白质样品(抗原)的制备:① 细胞的处理方法:向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液(三中蛋白酶抑制在使用前加入,终浓度为2ug/ml)在冰上裂解30—60min,然后再插入冰盒进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次2-3秒,重复3-4次,再离心12000rpm3-5min,吸取上清备用。(超声强度不能过大,防止蛋白碳化)组织的处理方法:按实验要求将组织从动物体内取出(样品不宜反复冻融),取少量(1-2g左右)放入玻璃匀桨器中研磨成匀浆,然后转入EP管中进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次5-7秒,重复5-6次,再离心12000rpm3-5min,吸取上清备用。②上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的上样Buffer,然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白变性,方可作为样品点样。(注意:在加热组织裂解液时,肝脏和肾脏组织要特别注意其本身浓度,在制作裂解液时就适当稀释,否则加热后会凝结成固态。还有些组织处理后很粘稠,有带丝状物,这是未裂解的核酸,可以适当离心后再用。)免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。 (1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。