产品属性：
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
| NADP苹果酸脱氢酶测试盒50管/48样 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01S9519 |
商品介绍：
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH， NADP-MDH主要存在于真核细胞中。
测定原理：
NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
人 AKAP5 基因全长ORF克隆
人 LRR1 基因全长ORF克隆
人 OLFML1 基因全长ORF克隆
人 LHX9 基因全长ORF克隆
人 ADH7 基因全长ORF克隆
人 OAS1 基因全长ORF克隆
人 DFNB59 基因全长ORF克隆
人 LDLRAD3 基因全长ORF克隆
人 TNIP3 基因全长ORF克隆
人 OR11A1 基因全长ORF克隆
NADP苹果酸脱氢酶测试盒50管/48样猪心肌特异性肌钙蛋白T()免疫试剂盒进口、组装
猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒进口、分装
猪酰基辅A去饱和(SCD)免疫试剂盒现货供应
猪纤溶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫试剂盒*直销
猪纤溶原激活物抑制因子(PAI)免疫试剂盒进口、组装
猪氧化(COX)免疫试剂盒进口、分装
猪细还原(CCR)免疫试剂盒现货供应
猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫试剂盒*直销
猪细胞间粘附分子2(ICAM-2)免疫试剂盒进口、组装
猪戊糖素(PE)免疫试剂盒进口、分装
猪瘟抗体免疫试剂盒现货供应
操作流程：
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
