磁珠法土壤和粪便基因组​-DP712

磁珠法土壤和粪便基因组

产品简介 

   本试剂盒采用的脱腐缓冲液系统，可以将土壤样本中的腐植酸尽可能的去除，并且 配有的研磨珠可有效破碎土壤样本中的各种复杂成分，保证从土壤中提取基因组DNA的完整 性，同时本试剂盒也适用于粪便样本的基因组DNA提取。 

使用本试剂盒回收的DNA杂质少，完整性好，可直接用于PCR、酶切等分子生物学下游 实验。 

产品特点

 适用范围广：适用于花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、红土、黑土、粉尘等多类土 壤环境样本的提取，同样适用于粪便样本的提取。 操作便捷：能够集中在相对较短时间内完成实验操作。 

高纯度：与磁珠法纯化相结合，提取的DNA纯度高，可直接用于下游实验。

 注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

 1．新采取的样本会得到更高的得率，不同样本在采样前应先查阅相应的保存条件。

 2. 在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会影响产物纯度。 

3. 缓冲液GFA、去蛋白液RD和漂洗液PWD使用前请参照瓶上标签加入相应的醇。 

4. 过量的DNA可能抑制下游PCR反应，遇到这种情况建议将DNA模板进行稀释后使用。 

5. 使用前检查缓冲液SC是否有沉淀，若有沉淀，请在37℃加热至溶解后使用。

 6. 粪便样本中可能有RNA残留，如果需要去除RNA，需自备RNase A溶液（目录号： RT405-02）。

操作步骤 

使用前请先在缓冲液GFA中加入异丙醇；在去蛋白液RD和漂洗液PWD中加入无水乙醇，加 入体积请参照瓶上标签。

 1. 样本处理

 1）土壤样本处理： 在2 ml离心管中加入样本0.25-0.5 g，加入500 µl缓冲液SA、100 µl缓冲液SC和0.25 g研 磨珠，涡旋振荡15 min至样本混匀或使用TGrinder H24组织研磨均质仪（OSE-TH-01） 混匀（6M/S的速度振荡30s，间隔30s，共2个循环）。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min，转移上清液（约500 µl）至新的2 ml离心管。

 注意：针对一些得率低或需提取真菌基因组的样本，建议涡旋震荡混匀或组织匀质仪震 荡混匀后70℃加热裂解15 min以提高裂解效率。 2）粪便样本处理： 在2 ml离心管中加入样本0.25-0.5 g，如果是液态样本则转移200 µl至离心管中，加入500 µl缓冲液SA、100 µl缓冲液SC和0.25 g研磨珠，（粪便样本中可能有RNA残留，如果需 要去除RNA，建议再加入10 µl RNase A（TIANGEN，RT405-02， 自备））涡旋震荡混 匀或组织匀质仪震荡混匀后70℃加热裂解15min提高裂解效率。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1 min，转移上清液（约500 µl）至新的2 ml离心管。

 注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可将温度提高至95℃以促进裂解。

 2. 加入200 µl缓冲液SH混匀，涡旋5 sec，4℃放置10 min。 

3. 12,000 rpm (~13,400×g ) 离心3 min，转移上清液至新的2 ml离心管，加入500 µl缓冲液 GFA（使用前请先检查是否已加入异丙醇），颠倒混匀。 

注意：转移上清时不要移走沉淀，否则可能降低DNA纯度。

 4. 加入10 µl磁珠悬浮液G，振荡混匀5 min。

 注意：为了确保磁珠重悬，请在使用前振荡混匀 

5. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠吸附后，小心吸去液体。