天根试剂盒FP209-Talent荧光定量检测试剂​-荧光定量pcr试剂盒​

天根试剂盒FP209-Talent荧光定量检测试剂 -荧光定量pcr试剂盒

产品简介：
     天根试剂盒FP209-Talent荧光定量检测试剂 -荧光定量pcr试剂盒 采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的专用试剂，可对目标DNA进行快速、特异性的定量检测。优化的预混液可缩短Real-Time PCR的反应时间，适用于标准或快速PCR仪。
     2 × Talent qPCR PreMix采用了抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶，配合优化的qPCR Buffer体系可确保本产品在所有的Real-Time PCR仪上进行高灵敏的快速qPCR反应，qPCR反应时间可缩短50%。此外，Buffer中添加了的H-Competitor因子和EP组分，还使得本产品具有广泛的样本普适性，对具有复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板以及长片段扩增等具有非常好的适用性。同时本产品还具有高扩增效率，高扩增特异性和宽广的可信范围等特点，在不影响PCR效果的前提下更快获得结果，节约科研时间和能源。

产品特点：
●  高灵敏的抗体修饰聚合酶，反应时间缩短一半
●  H-Competitor因子竞争氢键，特别应对高GC模板、复杂二级结构模板和长片段模板
●  EP组分稳定PCR体系，有效的保护酶活，抵御各种抑制剂的干扰
●  无色透明管代替棕色管，小改动蕴含大智慧

下游应用

适用于在各类荧光定量仪器上采用SYBR Green 法进行表达分析及核酸检测等类型实验，尤其适合高GC、复杂二级结构、杂质残留量高及长片段模板定量时使用。

实验例：

图1. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及国外A 公司（中）、B 公司（右）的同类产品定量人类UH11 基因（GC：73.4%），展示扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。DNA 使用量分别为20 ng，2 ng，200 pg，20 pg，2 pg。结果显示，与竞品相比TIANGEN FP209对于5个浓度梯度定量清晰，Ct 值靠前，熔解曲线峰型正常，标准曲线相关系数高。TIANGEN FP209 对高GC 模板具有良好的适应性和扩增效率。

图2. 使用TIANGEN Talent qPCR PreMix（FP209，左）及国外A 公司（中）、B 公司（右）的同类产品定量人类H2 基因，模板为使用TIANGEN KG203 粗提的人类293T 细胞系的基因组DNA（具有较多杂质），展示扩增曲线和熔解曲线。展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示，与竞品相比TIANGEN FP209 定量Ct 值靠前，熔解曲线峰型正常。TIANGEN FP209 对杂质含量高的模板具有优秀的抵抗力，保持较高的扩增效率。

图3. a：FP209（左）与FP205（右）包装管对比。使用无色透明管包装可以清楚看到管内剩余试剂量以及是否融化。b. 分别使用-20℃避光保存的FP209（左）与室温光照放置10 小时的FP209（右），定量不同起始浓度的人类H2 基因，展示扩增曲线、熔解曲线和Ct 值（U.D.:Undetected）。结果显示，两组结果无明显差异，光照对定量结果无影响，使用无色透明管包装不会影响产品质量。

1. 2 × Talent qPCR PreMix采用了抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶，配合特制的快速qPCR Buffer体系，可大大缩短变性、退火与延伸时间，可节省多达50%的反应时间，快速获得 实验结果。

 2. 本产品中特别添加了H-Competitor因子，能够竞争氢键、增强双链的打开强度，使本产品具 有广泛的样本普适性，对具有复杂高级结构的模板和长片段扩增等具有非常好的适用性。

 3. 本产品特制的快速PCR Buffer体系含有的PCR稳定因子——EP，能够有效的保护酶 活，抵御各种PCR抑制剂的干扰，保证了2 × Talent qPCR PreMix高扩增效率，高扩增 特异性、高扩增灵敏度和宽广的可信范围的特点。

 4. 2 × Talent qPCR PreMix中预混有SYBR Green I，PCR反应液配制时，只需加入模板、 引物、灭菌蒸馏水便可进行快速Real-Time PCR反应，操作简单方便。

 5. 本产品附带ROX Reference Dye，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号 误差，方便客户针对不同型号荧光定量PCR仪时选择对应浓度使用。 

6. 2 × Talent qPCR PreMix采用无色透明管包装，经检测，光照不会影响体系的定量的结果。 

试剂盒原理 

本产品采用了特异的抗体修饰热启动DNA聚合酶进行快速PCR扩增，通过检测反应进程中 SYBR Green I 的荧光强度，达到检测PCR产物扩增量的目的，适用于标准和快速PCR仪。

 1. 本产品中特异的抗体修饰热启动DNA聚合酶，95℃条件下孵育3 min即可激活全部酶活， 在缩短变性时间的同时避免了非特异性产物的扩增，可大大缩短变性、退火和延伸时 间，使PCR总运行时间缩短50%，更快获得实验结果，而不影响PCR反应效果。

 2. 本产品的快速PCR Buffer体系添加了的H-Competitor因子和EP组分，配合精心优化 的快速PCR Buffer体系，对具有复杂高级结构的模板、PCR抑制剂残留较多的模板以及 长片段扩增等具有非常好的适用性。

 3. 本产品针对cDNA模板和gDNA模板结构组成的差异，对PCR的体系反应步骤进行了特别 的优化，使较难扩增的gDNA模板也能获得良好的PCR结果。

 注意事项

 1．如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。使用时请上下颠倒轻轻混匀，请不要使用 振荡器进行混匀，尽量避免出现泡沫，并经瞬时离心后使用。

 2．引物纯度对反应特异性影响很大，建议使用PAGE级别以上纯化的引物。 

3．引物终浓度为0.3 μM可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。如果需要进一步优化， 可以在 0.2-0.5 μM范围内调整引物浓度。 

4．20 μl反应体系中，cDNA模板的使用量一般小于100 ng，基因组DNA模板量一般小于50 ng，逆 转录产物作为模板时，使用量应不超过PCR体系终体积的20%。