Carbomix Ca-NP柱
使用手册
色谱柱信息
Carbomix Ca-NP柱专为糖类、醇类的高效分离而设计。该新型填料是在低交联度聚苯乙烯/二乙烯苯(PS/DVB)颗粒的表面修饰磺酸基团(-SO3H)得到Carbomix H-NP，并在此基础上进一步螯合钙离子（Ca2+）得到的。极窄的粒径分布确保了高的分离效率，而较低的交联度则******其可以在流动相中发生溶胀，从而具有合适的比表面积和柱容量。图1是使用Carbomix Ca-NP10柱分离糖及糖醇混合物得到的一张色谱图。
分离机理
Carbomix Ca-NP固定相的分离机理包括离子交换作用以及与待测物亲水相互作用。此外还涉及了体积排阻、离子排斥、配体交换等机理。多种相互作用模式使Carbomix Ca-NP柱具备分离多种水溶性化合物的*能力。在分离中树脂交联度是一个重要参数。PS/DVB树脂是一种相对坚硬的凝胶介质。交联度越低，孔结构***越容易溶胀，也***越利于大分子化合物的渗透。因此，交联度5%的Carbomix树脂比10%交联度的树脂更适合于分离大分子量的低聚糖。小分子量的化合物可用8%交联度的Carbomix树脂进行分离。
色谱柱参数
我们可提供多种规格的Carbomix Ca-NP柱，内径从75 μm到21.2 mm，长度从5 cm到30 cm不等。此外还可根据客户的要求定制色谱柱。色谱柱的长度和内径会影响分离的效果以及分析所需的时间。因此，在选择Carbomix柱的规格时，一定要******选用的色谱柱内的树脂量恰好能够达到所需要的分离效果。如果化合物在树脂上保留过强，例如，在7.8´300 mm柱子上保留时间太长时，可选用短的柱子如150 mm色谱柱来缩短分析的时间。
色谱柱操作
样品制备 Carbomix Ca-NP柱适合分离中性样品，请务必将待分析样品的pH控制在5-9范围内，并经0.45 μm滤膜过滤后，再进样。
图1 在Carbomix Ca-NP10（10 μm, 8%交联度, 7.8´
流动相：超纯水
流速：0.6 mL/min
柱温：
进样量：10 µL
检测器：示差折光检测器
样品：
1. 松三糖 (Melezitose)
2. 麦芽糖 (Maltose)
3. 葡萄糖 (Glucose)
4. 甘露糖 (Mannose)
5. 果糖 (Fructose)
6. 核糖醇 (Adonitol)
中特别有效。有机改性剂可以用于减少分析的时间，但也可能因渗入PS/DVB使其溶胀从而改变树脂的容积。乙醇和异丙醇与乙腈的性质相似。不推荐使用甲醇、四氢呋喃、二甲基甲酰胺以及其它非极性溶剂，因为它们可能会使柱床发生收缩或溶胀。在色谱柱的使用过程中，强烈建议采用在线脱气的方法。
温度 温度对Carbomix Ca-NP柱的分离性能有着显著影响。柱温会影响保留时间和分离效率。对于某一特定分析而言，温度所产生的影响取决于该分析所涉及的化学特性、填料类型、流动相等。但对大多数应用而言，随着柱温的升高保留时间将会缩短，柱效将会提高，同时柱压会随之降低。升高温度可减少固定相中慢传质过程所引起的谱带展宽效应，从而可提高分离的效率。此外，升高温度还能减小流动相的粘度，使溶质分子更容易地渗入树脂内部，从而可以获得高的分辨率。因此，控制温度对于******的定性及定量分析都非常重要。注意：Carbomix Ca-NP柱的建议柱温为
流速 由于合成的Carbomix介质交联度较低，Carbomix树脂更像软凝胶，在高流速下会产生高柱压（Carbomix柱工作压力上限请参见技术参数表）。Carbomix Ca-NP通常在低流速下使用。尽管低流速会增加分析的时间，但这将有助于提高色谱柱的柱效。在某些应用中， 低的操作流速还允许将2-3根色谱柱串联起来，可用于分离和检测复杂样品中的组分。在常规分析中， 对规格为7.8´
pH 为了获得优良的分离效果和延长柱的使用寿命，Carbomix Ca-NP柱的pH适用范围是5-9。如使用了超出上述pH范围的流动相，将可能对色谱柱造成不可修复的损伤。
如特殊情况下需要使用Carbomix Ca-NP柱来分析酸性样品，则务必在进样前对样品进行预处理，以******其pH在5-9的中性范围内，方可进样。
安全注意事项
Carbomix柱通常在中等压力下运行。如果管路连接不紧，将会导致有机溶剂和注入样品的泄漏，从而对操作人员的健康产生影响。一旦发生泄漏，应佩戴适当的手套进行处理。另外当打开色谱柱时还应采取适当的保护措施，以防止微小的填料颗粒进入呼吸道。
色谱柱安装与操作
色谱柱在运输过程中或在没有使用时，它的两端总是用堵头进行密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时，首先移去两端的堵头。请注意将流动相流动的方向与柱上标记的方向保持一致。除非出于特殊考虑，例如为了清除堵在色谱柱入口端的脏污等而需要将色谱柱反接以进行冲洗时，建议用户在接上色谱柱时一定要遵循柱上标记的方向。由于色谱柱的连接是整个色谱操作过程的一部分，如果密封卡套过紧，或安装不合适，或者密封卡套与色谱柱端口不匹配，都有可能导致溶液的泄漏。请按照下面步骤将色谱柱与密封卡套相连接，从而将色谱柱接入HPLC系统：
（a）******使用的管线，请依次将管线接头和密封卡套装在外径1/16”的管线上。密封卡套的宽口端应朝向管线接头。由于Carbomix色谱柱的使用温度通常较高，因此色谱柱前的连接管线推荐使用50 cm以上长度的金属管线，以******流动相在进入色谱柱前被充分预热。
（b）将管线紧紧插入色谱柱的接口，向前滑动密封卡套和管线接头，并使管线接头的螺纹与色谱柱端口的螺纹相互衔接，然后拧紧管线接头。如果管线为高分子材料，请转到步骤（d）；如果是金属管线，请继续（c）。
（c）在用力将管线压入柱端接口之后，用1/4”扳手将已拧紧的螺帽再进一步紧固。
（d）对色谱柱的另一端采用上述方法进行操作。
（e）连接好管线后，先设定流速为0.1mL/min，待柱温升至设定温度后再逐渐升高流速至设定值。
（f）使用结束后，先将流速设定为0.1mL/min，再降低柱温至40 ℃以下后，方可取下色谱柱。
色谱柱保养
运输溶剂 新的Carbomix Ca-NP柱保存在超纯水中。在储存和运输过程中，柱填料可能会干涸。这时推荐用10-20倍柱体积的保存溶剂进行冲洗以活化色谱柱。接着可用用户自己选择的流动相冲洗色谱柱。流速由0.1 mL/min逐渐升至所需的操作条件，直至基线稳定为止。（建议整个操作过程均待温度升至50 ℃以上、压力稳定时进行）。
储存 长期不用时，CarbomixCa-NP柱保存在超纯水中。每根色谱柱在运输过程中均会附有两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸，请用堵头塞紧色谱柱的两端。
典型应用
Carbomix Ca-NP树脂基质色谱柱为食品和饮料中糖类、醇类等的分离，以及生物化学、生物医药、生物技术等方面的应用提供了许多便利。
醇类分析涉及糖类与乙醇、乙二醇和发酵产品等的分离。
糖类分析样品包括甜菜糖、糖蜜、玉米糖浆、戊糖、纤维素水解物、寡糖、葡萄糖、半乳糖、蔗糖、果糖等
