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试剂盒名称:大鼠白三烯C4elisa试剂盒
英文名称:Rat Leukotriene C4,LT-C4 elisa Kit
规 格:96T
保存条件:2-8℃
自备材料:
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
4. 标准规格酶标仪。
5. 7℃恒温箱。
实验步骤:
1.分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。人雌激素(E)每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,37℃温育60分钟。
2.弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
3.人雌激素(E)每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
4.取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
5.人雌激素(E)测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。?测定应在加终止液后15分钟以内进行。
6.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,人雌激素(E)再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
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