详细介绍
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒供应商 |
英文名称 | Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR |
编号 | FS-R1001 |
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
FS-R1001 鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒 Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR Acarbose 56180-94-0
FS-R1002 鲍肌肉症病毒PCR检测试剂盒 Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR Acarbose 56180-94-0
FS-R1003 鲍球状病毒PCR检测试剂盒 Abalone Spherical VirusPCR Acarbose 56180-94-0
FS-R1004 伞枝梨头霉PCR检测试剂盒 Absidia corymbiferaPCR Acarbose 56180-94-0
FS-R1005 多食棘阿米巴属通用PCR检测试剂盒 Acanthamoeba spp.PCR Acyclovir 59277-89-3
FS-R1006 武氏盾螨PCR检测试剂盒 Acarapis woodiPCR Acyclovir 59277-89-3
FS-R1007 莱氏无胆甾原体PCR检测试剂盒 Acholeplasma laidlawii PCR Acyclovir 59277-89-3
FS-R1008 无色杆菌属通用PCR检测试剂盒 Achromobacter spp.PCR Acyclovir 59277-89-3
FS-R1009 鲍氏不动杆菌PCR检测试剂盒 Acinetobacter baumanniiPCR Acyclovir 59277-89-3
FS-R1010 鲁氏不动杆菌PCR检测试剂盒 Acinetobacter lwoffiPCR Adenosine 58-61-7
FS-R1011 不动杆菌属通用PCR检测试剂盒 Acinetobacter spp.PCR Adenosine 58-61-7
FS-R1012 枝顶孢霉PCR检测试剂盒 Acremonium strictumPCR Adenosine 58-61-7
FS-R1013 伴放线放线杆菌PCR检测试剂盒 Actinobacillus actinomycetemcomitansPCR Adenosine 58-61-7
FS-R1014 胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒 Actinobacillus pleuropneumoniaePCR Adenosine 58-61-7
FS-R1015 马杜拉放线菌PCR检测试剂盒 Actinomadura maduraePCR Adiphenine HCl 50-42-0
FS-R1016 白乐杰马杜拉放线菌PCR检测试剂盒 Actinomadura pelletieriPCR Adiphenine HCl 50-42-0
FS-R1017 牛型放线菌PCR检测试剂盒 Actinomyces bovisPCR Adiphenine HCl 50-42-0
FS-R1018 戈氏放线菌PCR检测试剂盒 Actinomyces gerencseriaePCR Adiphenine HCl 50-42-0
FS-R1019 衣氏放线菌PCR检测试剂盒 Actinomyces israeliiPCR Alarelin Acetate 79561-22-1
FS-R1020 内氏放线菌PCR检测试剂盒 Actinomyces naeslundiiPCR Alarelin Acetate 79561-22-1
FS-R1021 化脓放线菌PCR检测试剂盒 Actinomyces pyogenesPCR Alarelin Acetate 79561-22-1
FS-R1022 放线菌属通用PCR检测试剂盒 Actinomyces spp.PCR Alendronate Sodium 121268-17-5
鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒供应商FS-R1023 腺伴随病毒PCR检测试剂盒 Adenoassociated Virus(AAV)PCR Alendronate Sodium 121268-17-5
FS-R1024 腺病毒型PCR检测试剂盒 Adenovirus(AV)APCR Alendronate Sodium 121268-17-5
FS-R1025 腺病毒通用PCR检测试剂盒 Adenovirus(AV)PCR Alendronate Sodium 121268-17-5
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。