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外泌体的提取方法盘点

阅读:14发布时间:2024-12-1

 获得高纯度的外泌体是开展后续研究的基础。目前分离外泌体的方式有许多种,如:

1.色谱法

2.超滤法

3.多聚物沉淀法

4.磁珠免疫法等

 

        但超速离心法仍旧是业内推崇的外泌体分离金标准,这是因为超速离心法可以准确地重复获取外泌体,同时较大限度减少蛋白质聚集体和杂质离子的共纯化现象。如果选择超速离心法,那么可以依托日立离心机,来获取更高纯度的外泌体。

 

        基于超速离心法的CP100NX 外泌体分离方案,依托于超速离心机的外泌体分离方案大致有两种:分别是差速离心法和密度梯度离心法。

 

        其中密度梯度离心法可以成功地将亚细胞成分(例如过氧化物酶体,线粒体等)分离到密度梯度溶液中的不同层中。外泌体粗提样品被放置在梯度液顶部,当施加离心力时,样品中的颗粒以特定的速率通过梯度,该梯度以从上到下的密度增加。

 

        样品中的外泌体将在 1.15-1.19 g/ml 的密度范围富集,随后可以通过分馏收集。密度梯度超速离心对从蛋白质聚集体和非膜颗粒中分离出外泌体非常有效。在日常分离中,两种离心方法可以搭配使用,会有助于获取更高纯度的外泌体。

 


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