技术简介
染色质免疫沉淀测序(Chromatin Immunoprecipitation Sequencing,ChIP-seq)是一种将染色质免疫共沉淀(ChIP)与二代测序技术(NGS)相结合,用于研究蛋白质与DNA的相互作用的技术。
技术原理
将染色质免疫共沉淀和高通量测序相结合,通过目的蛋白的特异性抗体,将目的蛋白-DNA复合物沉淀下来,从而获取该目的蛋白结合的DNA。再通过DNA高通量测序,获得该蛋白在染色体上的分布情况。利用该技术不仅可以检测转录因子在全基因组上的结合位点,还可以研究各种组蛋白修饰在全基因组上的分布情况。
应用领域
1.癌症研究:
鉴定肿瘤特异性表观遗传标记(如SETD2突变导致的H3K36me3缺失),发现潜在治疗靶点。
解析癌基因与抑癌基因的调控机制,为个性化治疗提供依据。
2.发育生物学:
追踪胚胎发育过程中组蛋白修饰的动态变化,揭示细胞命运决定的表观遗传机制。
研究干细胞分化过程中关键转录因子(如Oct4、Sox2)的结合模式。
3.神经科学:
探索神经元活动依赖的表观遗传调控,如学习记忆相关基因的染色质重塑。
4.农业与微生物学:
解析作物经济器官(如种子、果实)的表观遗传图谱,助力抗逆育种。
研究微生物中DNA-蛋白质互作,揭示抗生素耐药性机制。
技术流程
分析流程
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