基因分型是一种在不同个体间检测他们的DNA 序列以分析遗传差异的过程。用于基因分型的方法很多,使得研究人员有能力研究人类、微生物和植物中的基因多样性。 单核苷酸多态性 (SNPs) 是其中一种最为普遍的遗传变异类型,包括某个特定位点的单核苷酸突变。SNP 基因分型已经被证实在识别许多物种的疾病相关突变中非常有用,因此也已开发出很多针对 SNP 检测的技术1。
Kompetitive 等位基因特异性 PCR 因其高准确性、高性价比并在分析设计方面的高度灵活性而成为一种最为广泛使用的 SNP 基因分型技术。KASP使用两条等位基因特异的正向引物和一条通用反向引物,通过聚合酶链式反应 (PCR) 扩增目标 DNA 序列,与其序列相对应的反应产物则被标记上荧光染料。如果一个样品是纯合子,PCR 产物将只会被 HEX或 FAM 荧光染料标记,但如果是杂合体,则会出现被 HEX 和 FAM 同时标记的产物。未参与标记的荧光染料会被淬灭2,3。KASP 可在微孔板中进行操作,并且可使用荧光微孔读板机进行检测。
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