已知促炎和抗炎细胞因子在自身免疫、炎症调节和传染病中发挥着重要的作用。同时在代谢紊乱、肿瘤学也起着重要作用,尤其是抗肿瘤免疫应答。Cisbio 公司提供各种细胞因子和趋化因子定量的均相时间分辨荧光 (HTRF) 检测试剂盒。HTRF 技术非常适合监测细胞因子和趋化因子在细胞实验中的释放,特别是像外周血单个核细胞 (PBMC) 这样的物理模型。通常,细胞因子释放的调节依赖于使用药物化合物来诱导或抑制它们的分泌。为了进一步了解这些药物的作用机制,需要我们仔细分析它们的作用,特别是对细胞活力的影响。
本应用介绍了如何使用 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机和 SpectraMax Minimax300 细胞成像仪如何对细胞因子分泌和细胞活性进行分析。该方法可以逐孔/逐细胞进行 HTRF 和细胞活性检测,并通过细胞形态来确定其质量。本文将介绍 (i) 如何经过处理的 PBMC 中诱导细胞因子分泌,(ii) 如何通过HTRF方法检测细胞因子,(iii)如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox细胞完整性检测试剂盒评估 PBMC 活性,(iv) 何将细胞因子浓度转化成 PBMC 活性。
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