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其林贝尔摇床的细胞增殖的因素分析

阅读:140发布时间:2021-11-8

1 材料


BP211D 型 1/1 万天平(德国 Sartorius 公司);BDS400 型倒置显微镜(中国 Opetec 公司);SC3610 型低速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司);HF212 型二氧化碳培养箱(上海力申科学仪器有限公司);YT-CJ-1N 型超净工作台(北京亚泰科隆仪器技术有限公司);Multiskan FC 型酶标仪[赛默飞世尔(上海)仪器有限公司];TS-1 型水平脱色摇床( 海门市其林贝尔仪器制造有限公司 );LDZF75L-11 型立式高压蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂);KQ-100E 型*(昆山市超声仪器有限公司);FACS CantoⅡ流式细胞仪(美国 BectonDickinson 公司);ChemiDocTM型 MP Imaging System(美国 Bio-Rad 公司)。


2 方法


As2O3溶液配置:将购买的化 合 物 溶 解 于 1 mol·L-1 的 氢 氧 化 钠 中 ,加 入1 mol·L-1的盐酸调 pH 至 7.0,再加入生理盐水将其稀释成浓度为 10 mmol·L-1的亚盐溶液,滤过除菌,4 ℃冰箱保存备用。临用前取少量亚盐溶液,用 RPMI 1640 培养基稀释成所需浓度。DHA 溶液配置,将购买的化合物溶解于 DMSO,配制成浓度为 100 mmol·L-1 的 DHA 浓溶液,滤过除菌,4 ℃冰 箱 保 存 备 用 。 临 用 前 取 适 量 DHA 浓 溶 液 ,用RPMI 1640 培养基稀释成所需浓度。将 THP-1 细胞培养于含 10% 胎牛血清,1% 青-*混合液(100 U·mL-1 *和100 mg·L-1*)和 0.05 mmol·L-1的 β-巯基乙醇的 RPMI 1640 培养基中,培养于 37 ℃,5% CO2饱和湿度的培养箱中。根据细胞生长情况,每 2~3 d 半换液法传代 1 次。






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