上海蚁霖科学仪器有限公司
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阅读:131发布时间:2021-11-8
1 材料与方法
APP-PS1-HEK293细胞株 购 自 上 海 酶 联 科 技 有限公司;ICT 纯度大于或等于98%(高效液相色谱法)购自南京泽朗医药科技有限公司,使用甲醇配制成10μmol/L备用;ELISA 测定试剂盒(DAB140B)购自美国 R&D Systems 公 司;PrimeScript RT 试 剂 盒(RR047A)和 SYBRPremixExTaq(RR820A)购 自日本 TaKaRa生物技术有限公司;β位 淀 粉 样 前 体 蛋白裂解酶1(BACE1)抗体(ab2077)、早老素1(PS1)抗体(ab76083)、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)抗体(ab1997)、Aβ1-40 抗 体 (ab20068)和 GAPDH 抗 体(ab8245)购自英国 Abcam 公司。辣根过氧化物酶标记的山羊抗小 鼠 或 兔IgG 抗 体(M21003L)购 自 上 海艾比玛特生物医药有限公司,微孔板快速振荡器(其林贝尔QB-9002)。
2 结 果
淀粉样前体蛋白(APP)代谢异常所致的 Aβ沉积是导致 AD 的 重 要 病 理 基 础。正 常 情 况 下,APP有非淀粉样代 谢 途 径 和 淀 粉 样 代 谢 途 径2条 代 谢 途径,以非淀粉样代谢途径为主。APP 被 α-分 泌 酶 切割,产生具有可溶性片段sAPPα和 C 末端片段 C83,C83进一步被γ-分泌酶裂解产生非致病性的 P3多肽和 APP胞内区(AICD)。α-分 泌 酶 的 切 割 点 位 于 Aβ结构域 内 部,能 阻 止 完 整 Aβ 的 生 成。
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