1 材料
1.1 仪器
2695 型高效液相色谱（HPLC）仪（美国 Waters 公司）；64R 型低温高速离心机（德国 Beckman 公司）；BT25S型电子天平（德国Sartorius公司）；HSC-12B型水浴氮吹仪（上海旦鼎国际贸易有限公司）；QL-901 Vortex型涡旋混合器（江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；T18型高速分散机（德国IKA公司）；Scientz-ⅡD型超声波细胞破碎机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.2 药品与试剂
AP 对照品（批号：2015109，纯度：≥99％）、AP 原料药（批号：XC2014122，纯度：≥98％）均购自西安小草植物科技有限公司；聚乙烯吡咯烷酮（PVP，天津博迪化工有限公司）；*E（TPGS，美国Sigma公司）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
1.3 动物
清洁级昆明种小鼠，雌雄各半，2月龄，体质量（20±2）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物使用许可证号：SYXK（黑）2018-007。
2 方法与结果
色谱柱：Shimadzu ODS-SP（250 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相：甲醇-水（70∶30，V/V）；检测器：紫外检测器；检测波长：340 nm；柱温：35 ℃；流速：1.0mL/min；进样量：20 µL。精密称取 AP 对照品 4.89mg，溶于适量甲醇中，制成质量浓度为1 mg/mL的标准溶液。用甲醇将上述标准溶液逐级稀释成不同质量浓度的系列标准溶液，于4 ℃冰箱中保存，备用。取小鼠空白血浆100 μL至离心管中，加入甲醇500 μL，涡旋振荡，混匀，以8 000 r/min离心 5 min，吸取上清液，以氮气流吹干，残渣用甲醇100 μL 复溶，以 10 000 r/min 离心 5 min，吸取上清液适量，进行HPLC定量分析。
3 讨论
采用蛋白沉淀法对血浆/组织样品进行处理，并比较了乙腈和甲醇作为沉淀剂的蛋白沉淀效果。结果发现，以甲醇作为沉淀剂的效果更好，因此本研究选择甲醇作为蛋白沉淀剂。由于AP的溶解性极差，且目前并无市售的口服制剂，故本研究采用复合溶媒[聚乙二醇-乙醇-生理盐水（5∶2∶3，V/V/V）]对 AP 原料药进行溶解。与常用乳剂参比制剂相比，复合溶媒所含辅料少、制备方法简单且稳定性好，以复合溶媒溶解的AP溶液作为参比制剂，进行体内组织分布研究及靶向性评价。
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