上海蚁霖科学仪器有限公司
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阅读:132发布时间:2021-11-8
粪大肠菌群与大肠菌群相似,主要以其检出情况来判断食品是否受到粪便污染。粪便中既有正常肠道菌,也可能有肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等)。因此,食品受到粪便污染就对食用者造成潜在的危害。通常情况下,粪大肠菌群与大肠菌群相比,在人和动物粪便中所占的比例较大,而且由于粪大肠菌群在自然界容易死亡等原因,该菌群的存在可认为食品直接或间接受到了近期的粪便污染。
1 材料与方法
1.1 材料与设备
1.1.1 实验材料
大肠埃希氏菌(Escherichia coli):ATCC25922,美国ATCC标准菌株库;月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、EC肉汤培养基:北京陆桥技术股份有限公司;无菌生理盐水(0.85%NaCl)、无菌1mol/L NaOH、无菌1mol/LHCl。
1.1.2 仪器设备
LRH-150恒温培养箱:郑州生元仪器有限公司;SHA-C恒温水浴箱:常州诺基仪器有限公司;BXM-30R高压蒸汽灭菌器:上海博讯实业有限公司医疗设备厂;SW-CJ-2D超净工作台:沪净净化公司;JY 5002电子天平:上海良平仪器仪表有限公司;HN-08均质器:上海汗诺仪器有限公司;XW-80A振荡器:海门市其林贝尔仪器制造有限公司。
1.2 检测方法
1.2.1 国标方法(GB 4789.39—2013)
将25 g(mL)检样加入225 mL稀释液,均质,10倍系列稀释,选择适宜3个连续稀释度的样品匀液,接种LST肉汤管,每管接种1 mL(如接种量需要超过1 mL,则用双料LST肉汤),(36±1)℃培养24~48 h,产气管进行复发酵试验,取培养物1环,移种于EC肉汤管中,(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h,计EC发酵管阳性管数,查MPN表报告结果。
1.2.2 改进方法
将25 g(mL)检样加入225 mL稀释液,均质,10倍系列稀释,选择适宜3个连续稀释度的样品匀液,直接接种EC肉汤管,每管接种1 mL(如接种量需要超过1 mL,则用双料EC肉汤),(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h,计EC发酵管阳性管数,查MPN表报告结果。
2 结果与讨论
准备3份不同浓度大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)菌液,分别为低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/mL)、高(110 MPN/mL)3个浓度值,分别使用国标方法和改进方法重复7次检测粪大肠菌群。对20个实际瓜子样品进行粪大肠菌群检测,国标方法与改进方法的阳性发酵管数存在不一致情况;国标方法检测瓜子中粪大肠菌群阳性检出率为45%,改进方法检测瓜子中粪大肠菌群阳性检出率为40%;整体趋势上,改进方法测得结果略低于国标方法,但改进方法测得结果均在国标方法95%置信区间内。
3 结论
改进后检测方法与当前国标方法相比,改进方法检测数值相关系数为r=0.943,P=0.000,均在95%置信区间内,统计学意义上无显著区别。国标方法(GB 4789.39—2013)分为LST肉汤初发酵和EC肉汤复发酵两个过程,操作步骤较复杂,工作量较大,干扰因素多,需要经过48~72 h培养后才能得到测定结果,在进行大批量瓜子样品检测时耗时较长[12-13];改进方法是直接进行一步EC肉汤发酵过程,简单、快捷、经济、高效,可在24 h内得到测定结果,可用于实际瓜子样品大批量时的检测。
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