上海蚁霖科学仪器有限公司
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阅读：131发布时间：2021-11-8
糖尿病是糖尿病患者常见的微血管并发症，病变早期出现微量白蛋白，随病情进展，会出现肾小球肥大、肾小球硬化以及肾间质纤维化，是终末期的主要病因。西医治疗糖尿病主要是控制高血糖、高血压以及减少蛋白尿等对症治疗，目前为止还没有能*阻断糖尿病发生发展的药物，因此迫切需要研发更有效的药物来预防或减缓其进展。
1 实验资料
1. 1 仪器
荧光定量 PCＲ 仪( 美国 Applied Biosystems 公司) ; 流式细胞仪( 上海碧迪医疗器械有限公司) ; 成像系统( 美国 Bio － Ｒad 公司) ; 低温高速离心机( 长沙湘仪离心机仪器有限公司) ; 电子天平( 上海精密仪器仪表有限公司) ; 移液器( 德国 eppendorf 公司) ; 转膜仪( 美国 Bio － Ｒad 公司) ; 电泳仪( 中国北京六一仪器公司) ; 转移脱色摇床( 江苏其林贝尔仪器制造有限公司) 。
1. 2 药品与试剂
参芪补胰方组方: 生黄芪 30 g、太子参 15 g、麦冬 15 g、五味子 6 g、石斛 15 g、生熟地黄各 9 g、黄连 3 g、赤白芍各 9 g、川芎 9 g、丹参 9 g，制备成含生药 2 g /mL 的药液，由上海市中西医结合医院中药房提供。
1. 3 动物
SPF 级 SD 雄性大鼠 18 只，体质量 180 ～200 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，动物合格证号: 2015000542372。
1. 4 分组、造模及干预
18 只雄性 SD 大鼠适应性饲养 1 周后，随机抽取 6 只设为正常组，予普通饮食饲养; 其余 12 只予高脂高糖饲料喂养 6 周，证实大鼠存在胰岛素抵抗后，以 30 mg /kg STZ( 溶于 0． 1mmol/L 柠檬酸缓冲液，pH 4． 4) 于大鼠左侧下腹部腹腔注射，正常组注射相同给药容量的柠檬酸缓冲液。72 h 后剪尾端取血测末梢血血糖，血糖≥16． 7mmol /L 判定为高血糖，未再以 30 mg /kg STZ注射 1 次，此后每 3 d 检测血糖 1 次，血糖稳定≥16. 7 mmol /L 为糖尿病模型造模成功。再继续喂养，记录 24 h 尿量，计算尿白蛋白排泄率大于 30 mg为糖尿病造模成功。将造模成功的 12 只大鼠标号，随机等分为模型组和参芪补胰方组，参芪补胰方组给予 10 mL /kg 参芪补胰方药液灌胃，模型组和正常组给予等量生理盐水灌胃，均连续 12 周。
1. 5 血糖及尿白蛋白水平检测
末次灌胃结束后，采集 3 组大鼠 24 h 尿液，采用考马斯亮蓝法检测 24h 尿白蛋白水平; 大鼠禁食 12 h，以 10% *1． 0 mL 腹腔注射麻醉，腹主动脉采血，室温静置 1h，3 000 r/min 离心 10 min，分离血清检测血糖水平。
1. 6 肾形态学观察
摘除各组大鼠肾脏，生理盐水冲洗干净，多聚甲醛固定后，脱水、包埋、切片，进行PAS 染色以及 Masson 染色。
2 结 果
大鼠一般情况及血糖、尿白蛋白水平比较造模成功大鼠均出现多饮、多尿、多食、消瘦现象，正常组大鼠则没有什么变化，参芪补胰方组大鼠较造模组大鼠多饮、多尿、多食、消瘦等现象有明显改善。模型组大鼠血糖及 24 h 尿蛋白水平均明显高于正常组( P 均 ＜ 0． 05) ; 参芪补胰方组大鼠血糖及 24 h尿蛋白水平均明显低于模型组( P 均 ＜ 0． 05) 。见表 1。
3 讨 论
糖尿病是导致糖尿病患者终末期和慢性肾衰竭的主要原因，大约 40% 的糖尿病患者会发生糖尿病。糖尿病的发生机制比较复杂，其中炎症反应在其发展和发展中起着至关重要的作用。相关研究证实，大量的促炎因子包括 TNF － α、IL － 18、IL － 1β 和 MCP － 1 在糖尿病肾病中特异表达，引发炎症瀑布反应，产生大量氧自由基，导致糖尿病患者肾脏结构破坏。因此，阻断炎性激活通路可能对防治糖尿病具有重要意义。
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