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阅读:283发布时间:2022-6-4
我们在之前的文章里面已经对液相色谱做过相应的阐述,不知道大家有没有了解过呢?当然液相色谱是需要保护的,所以液相色谱保护柱应该怎么选择,小编自然也是要告诉您的,选择怎样的保护柱才是对您的液相色谱仪有利的呢?
来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不合理残留的固体颗粒。
来自于样品的污染主要指,未合理溶解的样品或者已合理溶解的样品进入色谱系统中,由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异,导致沉淀析出污染系统。特别是对于中药、自然产物、合成中间体及生物药品的检测,因基质的复杂性,色谱柱受污染的情况会更加严重。
会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等,从而带来检测成本高,测试结果不准确等各种影响。
保护柱的作用
保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材,使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度,延长分析柱使用寿命。
保护柱位于进样器与分析柱之间, 作用主要两方面:
1.截留不溶性颗粒。2. 吸附样品基质中的杂质。
以下几种情况建议使用保护柱:
1. 中药、自然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重,梯度洗脱时影响更大。不锈钢材质优缺点——大部分小分子化合物的分析,选择不锈钢材质保护柱居多,特别是当流动相体系使用到四氢呋喃(THF)或DMSO等一些溶解性较强的溶剂时,选择不锈钢材质,甚至对于HPLC系统的管路也需要替换成不锈钢材质,因THF对于PEEK管路有相当强的腐蚀作用。
从结构上分:卡套式(柱芯+柱套)和直接填装短柱
直接填装短柱优缺点——这种结构的保护柱实质就是短的色谱柱,一般填装的填料跟分析柱填料合理一样。生物样品分析中,用这种类型保护柱居多,除可过滤一些不溶颗粒外,还可除去一些在分析柱上易吸附的杂质。缺点是,一次性使用,污染严重时,只能报废。
卡套式保护柱优缺点——卡套式保护柱的柱套可反复使用,柱芯污染后可替换,厂家会提供配套的保护柱芯,但购买时需要注意,柱芯中有与分析柱匹配的填料,需要确认柱芯中的填料类型再购买。同时,柱芯和柱套需是来源于同一厂家的同一规格,否则,会存在匹配上的差异,导致峰型异常或者漏液。直连式保护柱优缺点——保护柱接口带螺纹,可直接与分析柱连接,死体积小,UPLC分析时建议选择直连式保护柱;缺点:购买时需保证接口与分析柱匹配。
2. 选择保护柱尺寸可按柱体积计算,保护柱体积按分析柱体积的5%~10%即可;如4.6*250mm的分析柱体积约为4mL,保护柱体积可选择在0.2~0.4mL之间为宜。同时,保护柱内径应与分析柱内径相同或相当。
保护柱使用注意事项
1. 独立式保护柱与分析柱连接时,连接管路尽可能短,且接口切面平滑,尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。6. 如同一保护柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保护柱需先清洗并用流动相平衡保护柱一段时间后,再接分析柱使用。
保护柱与柱前过滤器的区别和使用
使用保护柱的目的在于延长分析柱的使用寿命,当分析柱造价昂贵时,保护柱的价值尤其能体现,某些情况下,当使用的分析柱本身价格便宜,保护柱并非必选,推荐使用柱前过滤器更合适。仪表网 设计制作,未经允许翻录必究 .
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