Leica SP8 FALCON的使用技巧

Leica SP8 FALCON的使用技巧可以归纳为以下几个方面：

1. 荧光寿命测量步骤：

• 预览及调节参数：点击预览，系统会显示荧光强度图、平均荧光寿命图和平均荧光寿命曲线。根据光子数直方图中的红线提示，调节激光强度以获得理想的光子数。

• 设置条件并采图：在采集时间、采集帧数及光子数中选择设置一项。如果需要采集时间序列或三维图像，按常规共聚焦采集模式设置总时长或层切起点/终点。然后点击start进行采图。

• 数据分析：选择寿命成分数量，点击Fit，系统即自动进行曲线拟合。寿命成分数量可从1开始，直至获得满意的拟合曲线。系统根据拟合结果显示荧光寿命图。

2. 寿命成分拆分图像：
   根据拟合出的寿命成分，可以对图像进行拆分，得到不同寿命的图像。这特别适合于拆分光谱接近的不同染料或者染料和自发荧光。

3. 三维荧光寿命图像的采集和显示：
   对于厚样品，FALCON可以直接采集和显示三维的荧光寿命图像，甚至可以通过LAS X的3D重建模块制作成视频。

4. 开机顺序与操作界面：

• 开机时，注意FSU和CSU硬件的电源控制，先启动电脑，再打开显微镜控制的开关，然后依次打开其他设备。

• 进入操作界面后，可以选择不同的功能界面进行参数设定、扫描取图、图像处理和定量测量等操作。

5. 荧光寿命测量的原理：

• 使用光脉冲照射样本，测量发射光子到达的时间。这种测量需要在同一样本位置重复几次，测量几百个事件以达到大约10%的准确度。然后将数据按时间分组放入直方图中进行重建。

请注意，以上技巧是基于Leica SP8 FALCON的一般操作方法和原理，具体操作可能因设备配置和使用环境的不同而有所差异。在使用时，建议参考设备的操作手册或联系专业技术人员进行指导。