赛默飞UltiMate3000高效液相色谱仪的维护及保养

日常维护保养

1. 保持贮液瓶清洁，对专用贮液瓶应定期清洗；用试剂瓶作贮液瓶时，要经常更换。定期（如半个月）在稀硝酸溶液中超声、清洗过滤器，保持过滤器畅通无阻。

2. 使用HPLC试剂和新蒸二次蒸馏水作流动相，所使用的溶剂其截止波长一定要低于检测波长，对不是HPLC级的试剂要进行过滤（HPLC试剂出厂前已用0.02μm滤膜过滤）。对流动相一定要脱气。

3. 流动相使用不要超过两天，尤其是夏天，每天新鲜配制以免微生物的生长。腐蚀性溶剂或缓冲液在泵内存放不可过夜，否则溶剂会对泵起腐蚀作用。使用腐蚀性物质后要冲洗，先用水后用甲醇。

4. 每天开始使用仪器，注意放空排气，确保泵头、流动池以及其它流路系统中无气泡存在。

5. 珍惜保护色谱柱，避免柱头突然产生大的波动，扰动损伤柱床。如避免泵启动过速、升压过快、样品阀搬动过慢所造成的柱压大的波动。

6. 采用保护（警戒）柱，延长柱寿命。如污染物堆积于保护柱柱头，造成柱压升高，柱效下降，峰形变差时，卸下用强溶剂反冲后再用或更换新保护柱。

7. 避免超负荷进样，对250×4.6mm的柱子,进样量应不超过100μg。在灵敏度允许的前提下，应尽量将试样浓度降低，减少进样量（进样体积可保持不变），这是保持HPLC柱性能持久良好的重要举措之一。

8. 经常用强溶剂冲洗柱子，将柱内强保留组分及时洗脱出。反相柱用异丙醇--二氯甲烷（1：1）冲洗，正相（硅胶柱）用纯甲醇或异丙醇冲洗，时间均不少于1h。

9. 做完试验，及时用适当溶剂冲洗柱子和进样阀，尤其是对过夜的柱子和进样阀，一定要用足量的水洗净其中的盐类、缓冲液，再用甲醇或乙腈冲洗，并保存在乙腈（或甲醇）中。正相柱保存在非极性有机溶剂（如己烷）中。含盐流动相的冲洗方法：每天操作结束后，先用纯化水或含甲醇5%的水冲洗时间约20～30分钟，再用纯甲醇冲洗约30～60分钟（注：不能直接用有机溶液冲洗，盐类易析出，堵塞色谱柱，造成色谱柱性损坏；所用水是重蒸馏的水，必须抽滤和脱气）。不含盐的流动相冲洗方法：每天操作结束后，先用流动相冲洗约10～15分钟，再用含5%甲醇的水冲洗10～20分钟，最后用纯甲醇冲洗，时间约20～30分钟（注：不能直接用纯水冲洗，易造成流动停止）。

10. 以硅胶为基质的柱子，如C-18、C-8等，要控制好流动相的pH值，一般不要低于2.5，不高于7.0。pH＞8会使硅胶骨架溶解；pH＜2则键合相化学键易剥离。

11. 尽量用流动相溶解样品，一是避免出现拖尾峰、怪峰，二是避免试样在系统中由于溶解度降低而析出。

12. 用HPLC分析酸碱性物质，由于吸附作用（次级保留）使峰形拖尾。加入改良剂可以大大改善峰形，提高积分的准确度。一般规则是：①分析酸性物质，可加入1%有醋酸；②分析碱性物质，可加入10-20mmol/L三乙胺；③酸碱物质混为一体，可同时加入1%的醋酸和10-20mmol/L三乙胺。

（文本来源于网络）