利用上海百蕊生物的大鼠D-乳酸ELISA检测试剂盒来测量大鼠体内糖代谢变化
通过观察实验性脾气虚证大鼠肝脏葡萄糖激酶(GK)基因表达的变化;骨骼肌和脑组织中乳酸(LD)含量和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化;血糖和血清D-木糖含量的变化,来探讨实验性脾气虚证大鼠糖代谢的变化,为揭示中医脾气虚证的实质提供现代分子生物学理论基础。 方法 本实验采用番泻叶泻下和大黄泻下的方法制造实验性脾气虚证大鼠模型;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测大鼠肝脏葡萄糖激酶(GK)基因mRNA的表达;采用比色分析法测定骨骼肌和脑组织中乳酸(LD)含量和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化;采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度;采用比色分析法测定血清D-木糖(D-xylose)含量;观察实验性脾气虚证造模过程中大鼠的一般状况,如:体重增长值、精神状况、皮毛色泽、饮食量、饮水量、大小便等情况的变化;统计方法采用独立样本t检验。
结果 1.体重增长值:番泻叶泻下脾气虚组大鼠体重增长值与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.01),大黄泻下脾气虚组大鼠体重增长值与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.01)。 2.血糖:番泻叶泻下脾气虚组大鼠血糖与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.05),大黄泻下脾气虚组大鼠血糖与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.05)。 3.血清D-木糖含量:番泻叶泻下脾气虚组大鼠血清D-木糖含量与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.01),大黄泻下脾气虚组大鼠血清D-木糖含量与生理盐水对照组比较显著降低(P<0.01)。 4.骨骼肌中乳酸含量:番泻叶泻下脾气虚组大鼠骨骼肌中乳酸含量与生理盐水对照组比较显著升高(尸$lt;$0.05),大黄泻下脾气虚组大鼠骨骼肌中乳酸含量与生理盐水对照组比较显若升高 (P$lt;$0 .05)。5.骨骼肌中欢拍酸脱氢酶活性:番泻叶泻下脾气应组大鼠骨骼肌中SDH活性与生理盐水对照组比较显著降低(尸$lt;$0.05),大黄泻下脾气虚组大鼠骨骼肌中SDH活性与生理盐水对照组比较显著降低(尸$lt;$0.05)。6.脑组织中乳酸含量:番泻叶泻下脾气虚组大鼠脑组织中乳酸含量与生理盐水对照组比较显著降低(P$lt;$0.05),大黄泻下脾气虚组大鼠脑组织中乳酸含量与生理盐水对照组比较显著降低 (P$lt;$0 .05)。7.脑组织中欢拍酸脱氢酶活性:番泻叶泻下脾气虚组大鼠脑组织中SDH活性与生理盐水对照组比较显著降低(P$lt;$0.05),大黄泻下脾气虚组大鼠脑组织中SDH活性与生理盐水对照组比较显著降低(尸$lt;$0 .05)。8.肝脏中葡萄糖激酶基因表达情况:番泻叶泻下脾气虚组大鼠肝脏中葡萄糖激酶鑫因表达与生理盐水对照组比较显著降低(P$lt;$0 .01)。大黄泻下脾气虚组大鼠肝脏中葡萄糖激鹅基因表达与生理盐水对照组比较显著降低(尸$lt;$0.05)。番泻叶泻下脾气虚组大鼠肝脏中葡萄枯激禽墓因表达与大黄泻下脾气虚组大鼠比较显著降低护$lt;$0.05)。
结论1.实验性脾气虚证大鼠会出现糖的消化、吸收和代谢障碍。2.实验性脾气虚证大鼠骨骼肌的糖代谢障碍主要表现为:糖有氧氧化减弱,糖醉解增强,抢醉解终产物乳酸堆积。3.实验性脾气虚证大鼠脑组织的糖代谢障碍主要表现为:糖有氧氧化和糖醉解均减弱。4.实验性脾气虚证大鼠肝葡萄糖激醉墓因表达下降,肝糖原分解加速,肝糖异生作用加强,肝赃及外周组织对葡萄糖的摄取和利用减少,肝脏输出葡萄糖增多,进一步从分子生物学水平证明实验性脾气虚证大鼠会出现糖代谢障碍。5.苦寒泻下中药番泻叶和大黄比较,番泻叶可以作为苦寒泻下方法制造实验性脾气虚诬动梅模型的药物。
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