琼脂糖凝胶电泳介绍

琼脂糖凝胶电泳

步骤一、用蒸馏水将电泳槽和梳子冲洗干净.放在水平桌面上，并架好梳子.
　　

 步骤二、根据核酸分子量的大小配制不同浓度的琼脂糖凝胶，一般200～400bp的DNA片段， 可配制1.2～1.7%浓度的琼脂糖用于电泳.
 

步骤三、配制0.5XTBE电泳缓冲液100ml于三角烧瓶中，称取一定量的琼脂糖粉放入后沸水锅 或微波炉内加热熔化.冷却至60℃（需要时可加入溴乙锭），倒入电泳槽中，待凝固.
　　

步骤四、向电泳槽中倒入0.5XTBE，其量以没过胶面2mm为宜，小心移去梳子.如样品孔内有 气泡，应设法除去.
　　

步骤五、在DNA样品中加入0.2体积的载样缓冲液，混匀后，加入样品孔内.
　　

步骤六、接通电源，一般红色为正极黑色为负极，切记DNA样品由负极往正极泳动（靠近加样 孔的一端为负）.电压为1-5V/cm（长度以两个电极之间的距离计算）.
　　

步骤七、.根据指示剂泳动的位置，判断是否终止电泳.一般200～400bp的PCR产物50V电压， 电泳20～40min即可.
　　

步骤八、溴化乙锭染色后，紫外仪上观察电泳带及其位置，并与核酸分子量标准比较被扩 增产物的大小.