β—半乳糖苷酶标记试剂

β—半乳糖苷酶标记试剂

β—半乳糖苷酶已被广泛用于酶标记免疫分析，但主要用于免疫细胞化学。一种较好的底物是5—溴—4—氯—3—吲哚—β—D—吡喃型半乳糖苷（BCIG），它可以产生一种深蓝色的产物。此产物在乙醇和水中稳定，不溶解。

1．需要的溶液、试剂和特殊设备
BCIG；
N，N—二甲基甲酰胺；
1mmol／LMgCl2；
3mmol／L亚铁氰化钾用PBS溶解，DPX。
光学显微镜（通常带有照相机以便于记录结果）。

2．操作步骤
（1）用0．1mlDMF溶解4．9mgBCIG。
（2）加0．1mlBCIG溶液至10ml含有1 mmol／L MgCl2 3retool／L亚铁氰化钾的PBS中。
（3）滤纸过滤。
（4）加此溶液至标本，在室温孵育10～40min，用水冲洗终止反应。
（5）优化：如果需要，进行复染。
（6）用DPX封片。